【摘 要】
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无花果蛋白酶(EC 3.4.22.3)属于蛋白水解酶,主要存在于无花果树树胶中。无花果属于桑科榕属植物。无花果蛋白酶是一系列复合酶的总称,这些酶均为单链巯基蛋白酶,分子量25000左
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无花果蛋白酶(EC 3.4.22.3)属于蛋白水解酶,主要存在于无花果树树胶中。无花果属于桑科榕属植物。无花果蛋白酶是一系列复合酶的总称,这些酶均为单链巯基蛋白酶,分子量25000左右,其酶学性质类似于木瓜蛋白酶。无花果蛋白酶可用于食品工业中嫩肉剂,酿酒业中澄清剂及稳定剂,面点的改良剂;生产蛋白水解物;皮革和纺织工业中柔软毛表皮;医药中的驱虫剂;在肽的酶法合成中,无花果蛋白酶被认为是万能的催化剂。无花果树树胶相对比于果实蛋白酶含量高,且易于保藏和运输,因此为进一步开发无花果蛋白酶的应用,我们以山东无花果树(Brunswike,原产法国Ficus carica)的树胶为原料,采用阳离子交换和凝胶过滤层析分离纯化得到一种无花果蛋白酶。经SDS-PAGE和阴极电泳确定其为单链蛋白,分子量25kDa左右,活力染色结果确定其为蛋白酶。该酶最适合催化温度为65℃,催化酪蛋白的最适反应pH有两个,分别为7.0和9.0。重金属离子Cu2+、Zn2+、Hg2+对活力完全抑制,DTT、β-ME、L-Cysteine对活力有激活作用。该酶在65℃下半衰期大于1小时,75℃半衰期小于20分钟。37℃下pH7.0时酶水解酪蛋白的Km值为1.56mg/mL。L-半胱氨酸激活酶的最适合浓度为10-20mmol/L。每分子酶含有两分子的游离巯基。酶的最大吸收波长在280nm处。L-半胱氨酸与酶作用后,荧光光谱和圆二色谱显示酶的天然构象发生改变。
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