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以假茎直径2mm左右的“二水早”大蒜(Allium Sativum L.)试管苗为材料,分别进行了试管鳞茎诱导因子优化试验、试管鳞茎发生发育及休眠调控的生理生化基础研究,为研究大蒜试管鳞茎发生发育及休眠调控提供理论依据。 1.利用响应曲面设计法,对影响大蒜试管鳞茎形成和膨大的主要因子蔗糖、水杨酸和活性炭进行优化设计。通过分析,得出三因素的最优组合为蔗糖95.8g/L、水杨酸6.8mg/L、活性炭3.4g/L,在这一组合下鳞茎诱导率为99.7%,鳞茎重量为402.1mg。 2.利用高浓度蔗糖进行试管鳞茎定向诱导,研究其形成过程中的组织形态与生理生化变化规律。研究表明:鳞茎形成过程中,无侧芽出现,只有一个生长点;鳞茎总糖含量上升,还原糖含量与可溶性蛋白含量先上升后下降;POD、PPO活性随鳞茎的膨大而不断提高,在鳞茎膨大后期其活性逐渐下降;CAT活性与POD、PPO活性变化相反,呈先下降后上升的趋势;SDS-PAGE及POD同工酶电泳分析表明,鳞茎膨大期的谱带数目增多,谱带染色较深。 3.对不同重量试管鳞茎分别在25℃和15℃下进行发芽试验,结果表明:在25℃下所有试管鳞茎均不发芽,在15℃下试管鳞茎的发芽率随鳞茎重量的增加而升高,500mg以上的试管鳞茎发芽率达到100%;利用赤霉素、低温、低温+赤霉素、变温等方法处理试管鳞茎,以低温+赤霉素解除的休眠效果最好,其次为变温处理和低温处理,处理30天后鳞茎发芽率均在90%以上;单独使用赤霉素处理对解除试管鳞茎休眠没有效果。 4.对大蒜试管鳞茎进行低温和赤霉素+低温处理,研究其在处理过程中的生理生化变化。结果表明:两种处理下鳞茎的糖含量、蛋白含量、酶活性的变化趋势相似,赤霉素+低温处理的与单一低温处理相比,各项指标的变化值更高,特别是处理10天以后差别更明显;在处理过程中,鳞茎的总糖含量下降,蔗糖酶活性升高,还原糖含量先降低后升高,可溶性蛋白含量增加,POD和PPO活性升高,CAT先降低后升高。POD同工酶电泳分析表明:低温处理10天后谱带数目增多,处理15天和20天的谱带染色较深。