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单宁是一类多酚类次生化合物,广泛存在于各种植物中。在青藏高原强紫外、高海拔、低氧寒冷环境中,多种植物均具有较高水平的酚类次生化合物。本实验为阐明长期生活在高寒生态系统和不同植被生境中的小哺乳动物对次生化合物的利用对策,无菌收集高原鼠兔(Ochotona curzoniae)和根田鼠(Microtus oeconomus)粪便,分离并单克隆培养单宁降解菌菌株后,采用分子生物学方法进行菌种鉴定;在不同月份或在被灌胃不同剂量单宁后,利用紫外分光光度法测定肠道单宁降解菌单宁酶活力,从而探讨高原鼠兔和根田鼠肠道单宁降解菌单宁酶活力与所摄取单宁之间的关系。研究结果如下:
两种动物肠道中均具有能够降解单宁的菌株,从高原鼠兔肠道内分离鉴定出地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、醋酸杆菌(Acetobacterium)、脲芽孢八叠球菌(Sporosarcinaureae)、肺炎克雷伯氏菌(Klebsieila pneumoniae)、志贺氏菌(Shigella).和芽孢杆菌(Bacillaceae);从根田鼠肠道内分离鉴定出生癌肠杆菌(Enterobacter cancerogenus)、泛菌属(Pantoea)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、假单胞菌(Pseudomonas)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)和克雷伯氏菌(Klebsietla)。
除高原鼠兔肠道内地衣芽孢杆菌的单宁酶活力显著高于其它菌株外,两种动物体内的其它单宁降解菌的酶活力均无明显差别。此外,温度及pH对所有菌的降解能力也有相似的作用。
在野外生存环境中,6、7、8及9月份高原鼠兔和根田鼠的肠道单宁降解菌单宁酶活力变化趋势一致,均在8月份达到最大。
连续灌胃5、10及20mg.(kg-BW-d)-1剂量单宁后,与对照组相比,根田鼠各不同剂量组的肠道微生物单宁酶活力均显著增加(p<0.05)。剂量越大,达到最大值的时间越早。但高原鼠兔灌胃5和10mg.(kg-BW-d)-1单宁4天后,酶活力均显著低于对照组(p<0.01)。而20 mg·(kg-BW·d)-1组的酶活力在灌胃第1天就低于对照(p<0.01),这种抑制一直持续到第5天。
以上结果说明:两种植食性小哺乳动物均可依靠肠道内微生物降解动物体内没有进入细胞的单宁类次生化合物,其降解能力受到单宁浓度的影响。