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目的:通过研究不同皮肤扩张方式中VEGF和CD31的表达,以探讨适合于临床的最佳的皮肤扩张方式,为临床应用提供理论依据。方法:1实验动物:62只雄性新西兰大白兔,6月龄,体重2～3Kg,由河北医科大学动物实验中心提供。2动物分组:随机将动物按不同扩张方式分为5大组:A组(反复快速扩张组)、B组(快速扩张组)、C组(常规扩张组)、D组(植入不扩组)和E组(正常对照组);A、B两组每组20只,按标本采集时间又分为5组:分别为在扩张完成后维持1周,2周,3周,4周,6周取标本,每组4只动物;C组16只动物,分为4组:分别为在扩张完成后维持1周,2周,3周,4周取标本,每组4只动物;D组5只动物,分为5组:分别为植入扩张器后不扩张维持1周,2周,3周,4周,6周取标本,每组1只动物;E组1只动物,为不植入扩张器的正常对照组。3动物模型制备:实验动物称重,2.5g/L戊巴比妥钠静脉麻醉(25mg/Kg)。自两耳根后缘连线间横行切开皮肤;在头部皮肤与颅骨骨膜之间用血管钳钝性分离,植入50ml扩张器。自术后第3天开始扩张皮肤。A组:每日扩张1次,每次注无菌生理盐水20ml,维持30min,然后抽出20ml,间隔3小时,然后再注水20ml,照此反复3次,最后一次抽出15ml,以后每天重复以上的方法,10日完成注水;B组:每日扩张1次,每次注无菌生理盐水5ml,10日完成注水;C组:每3日扩张1次,每次注无菌生理盐水5ml,28日完成注水;D组:植入扩张器后不扩张;E组:不植入扩张器。4标本采集与处理:各组到取材时间后,全麻下在扩张皮瓣中央切取1cm×1cm大小的组织块作为标本。标本投入10%甲醛液中固定,常规脱水、透明、浸蜡、包埋,制成4μm连续切片。5观察指标及方法:5.1大体标本肉眼观察;5.2光镜组织学观察;5.3采用免疫组化SP法及计算机图像分析系统检测VEGF和CD31在扩张皮瓣中的表达。6采用SPSS11.5统计软件包进行统计学处理,以P<0.05为具有统计学意义。结果:1大体观察:动物实验过程中,所有实验动物未出现感染、扩张器外露、皮瓣坏死等并发症,均成活到预定观察时间。2组织学观察:A、B、C三组在不同维持期,血管增生明显,主要集中在真皮乳头层、网状层以及毛囊周围。3微血管密度(MVD):A、B、C三组在维持1周微血管密度均处于较高水平,随着维持时间的延长,微血管密度呈下降趋势,在维持4周时,微血管密度位于最低水平,而后再次升高。在维持1、2、3、4周,A组的MVD明显高于B组和C组(P<0.05),B组与C组比较无显著性差异(P>0.05);在维持6周,A组的MVD高于B组(P<0.05);维持6周的A组和B组的MVD明显高于维持4周的C组(P<0.05)。4 VEGF的表达:A、B、C三组在维持1周VEGF的表达均处于较高水平,随着维持时间的延长,VEGF的表达呈下降趋势,在维持4周时,VEGF的表达接近正常皮肤的水平,而后再次升高。在维持1周,A组的VEGF表达明显高于B组和C组(P<0.05),B组与C组差异不明显(P>0.05);在维持2、3、4周A组与B组、C组比较均无显著性差异(P>0.05);在维持6周,A组的VEGF表达与B组比较无显著性差异(P>0.05);维持6周的A组和B组的VEGF表达明显高于维持4周的C组(P<0.05)。5 VEGF与MVD的关系:VEGF阳性细胞的分布与血管分布高度一致。VEGF的阳性表达与MVD呈显著正相关(r=0.889,P<0.001)。结论:1反复快速皮肤扩张可明显增加扩张皮瓣中微血管密度,效果优于快速扩张方式和常规扩张方式。2反复快速皮肤扩张可明显提高扩张皮瓣中VEGF的合成与分泌,促进血管形成。3扩张皮瓣的血管化程度与维持扩张期、刺激强度有关。微血管构筑稳定期在维持扩张4周左右。4反复快速皮肤扩张提高了扩张皮瓣的血管化程度、缩短了疗程。