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铁在溶藻弧菌致病过程中扮演着重要的角色，从宿主体内获得铁的能力是弧菌定值、感染并导致疾病发生所必须，摄铁系统的由此变得必不可少。然而宿主由于受机体的严密监控而使得铁维持在很低的水平，且主要以血红素的形式存在，因此许多病原菌优先利用血红素作为铁源。血红素摄取系统的作用就是特异性捕获宿主血红素，解离出铁离子，以便弧菌能够在宿主鱼体内不因缺铁而能正常生长和繁衍下去，这一过程促进了溶藻弧菌攻击宿主机体的非特异性免疫预防，进一步引发水产养殖鱼类弧菌病。然而，溶藻弧菌如何利用血红素铁的机制尚没有阐明。本研究从溶藻弧菌摄铁系统相关基因的基因克隆开始，通过热启动法PCR扩增了溶藻弧菌HY9901菌株血红素摄取系统的6个相关基因（hutB、hutC、hutD、hutW、hutX和hutZ），并对该6个基因及相应的氨基酸序列进行了分析。结果表明：hutB的ORF为870bp，编码289个氨基酸，含有1个长度为23aa的信号肽序列，无跨膜结构域，PI为6.45，蛋白相对分子量为30.69kDa。hutC的ORF为1038bp，编码345个氨基酸，无信号肽序列，有9个跨膜结构域，PI为9.74，蛋白相对分子量为36.15kDa。 hutD的ORF为780bp，编码259个氨基酸，无信号肽无跨膜区，PI为6.73，蛋白相对分子量为28.83kDa。hutW的ORF为1437bp，编码478个氨基酸，无信号肽无跨膜区，PI为7.16，蛋白相对分子量为52.94kDa。hutX的ORF为504bp，编码167个氨基酸，无信号肽无跨膜区，PI为5.85，蛋白相对分子量为18.59kDa。hutZ的ORF为531bp，编码176个氨基酸，无信号肽无跨膜区，PI为5.19，蛋白相对分子量为20.24kDa。通过模拟不同的铁环境条件，利用qRT-PCR技术初步探究了9个血红素摄取相关基因（hutBCD、exbBD、tonB和hutWXZ）在富铁、缺铁、正常和混合铁培养基等不同铁环境条件下表达量的变化差异。结果表明：溶藻弧菌hutBCD、exbBD、tonB和hutWXZ在含有Fecl3的富铁培养基中，表达量与对照组变化不大；在含有血红素的环境下表达量皆显著增长，尤其在铁限制的环境下有血红素存在时各基因的表达上调极显著，且皆以倍比量增加；在含2-2’二联吡啶的铁限制环境下，hutBCD和hutWXZ基因的表达量都会出现下调现象，而exbBD和tonB基因的表达量会出现相反的显著上调现象，且exbBD和tonB在铁限制的环境下有FeCl3时，表达量上调显著，且比添加2-2’二联吡啶的缺铁实验组的表达量高。利用pET-28a(+)顺利构建了血红素摄取系统5个基因的原核表达质粒pET-hutB、pET-hutD、pET-hutW、pET-hutX和pET-hutZ，将其在BL21表达菌株中诱导表达，之后对诱导表达条件和蛋白纯化条件进行优化，并获得大量重组表达蛋白。SDS-PAGE和蛋白印迹检测分析表明5个重组蛋白表达成功且都有免疫反应性，且条带大小与预期一致。用纯化的HutB、HutW和HutZ重组蛋白对青石斑鱼进行免疫保护实验，ELISA实验结果显示：抗体在3个免疫实验组鱼体中都能检测到，且与对照实验组的抗体效价差异显著，各免疫试验组的抗体水平在第四周的时候达到高峰，3个重组蛋白对青石斑免疫保护率分别为：82.61%，73.91%和78.26%。可见，溶藻弧菌血红素摄取系统相关蛋白HutB、HutW和HutZ都具有免疫原性，可作为疫苗候选抗原蛋白，为相关高效亚单位疫苗的开发，进行免疫和生态防治，提供了深入研究的理论基础。