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【目的】探讨神经干细胞(NSC)、嗅鞘细胞(OEC)、造血干细胞(HSC)、雪旺细胞(SC)单独移植及神经干细胞与嗅鞘细胞联合移植(NSC+OEC)、造血干细胞与雪旺细胞联合移植(HSC+SC)对全横断脊髓损伤大鼠脊髓Ⅷ、Ⅸ板层神经元存活的影响,为细胞移植治疗脊髓损伤提供理论和实验依据。【方法】将动物分假手术组(SG组),脊髓横断手术组(CG组),神经干细胞(NSC)、嗅鞘细胞(OEC)、造血干细胞(HSC)、雪旺细胞(SC)单独移植组,和神经干细胞与嗅鞘细胞联合移植(NSC+OEC)、造血干细胞与雪旺细胞联合移植(HSC+SC)组。体外分别培养NSC、OEC、HSC、SC,立体定向将NSC、OEC、HSC、SC、NSC+OEC、HSC+SC分别移植入全横断损伤慢性期(术后14天)大鼠脊髓头侧、瘢痕及尾侧。灌注固定后取脊髓制作石蜡切片,行苏木素染色及免疫组化染色,分别计数脊髓Ⅷ、Ⅸ板层神经元数量及面积;观察宿主神经再生情况。使用SPSS 11.5软件包对数据进行统计学处理。【结果】1、培养的细胞分别经nestin、P75、CD34、S100免疫组织化学染色鉴定呈阳性反应。2、各组脊髓Ⅷ板层神经元数量比较发现CG组较SG组明显减少,OEC组与SC组均较CG组明显增多,NSC+OEC与HSC+SC联合移植组均较CG组明显增多,而HSC+SC组较HSC组多,OEC组较NSC+OEC组多,均有统计学意义(p＜0.05)。比较之,Ⅸ板层神经元数量CG组较SG组明显减少,NSC组、OEC组与SC组均较CG组增多,NSC+OEC与HSC+SC联合移植组均较CG组明显增多,HSC+SC组较HSC组多,均有统计学意义(p＜0.05)。3、各组脊髓腹角神经元面积比较,Ⅷ板层CG组较SG组明显减小(p＜0.05),但各单独移植组与CG组比较均没有统计学意义。而HSC+SC联合移植组较HSC组、SC组明显增大(p＜0.05),但NSC+OEC联合移植组与CG组、NSC组、OEC组比较均无统计学意义。Ⅸ板层神经元面积CG组亦较SG组明显减小(p＜0.05),NSC、OEC、SC组较CG组明显增大,比较有统计学意义(p＜0.05),而NSC+OEC联合移植组与NSC组、OEC组,HSC+SC联合移植组较HSC组、SC组均明显增大(p＜0.05)。4、5-HT神经纤维再生,CG组长入瘢痕220μm,NSC组长入瘢痕2460μm,OEC组长入瘢痕560μm,HSC组长入瘢痕1820μm,SC组长入瘢痕1770μm,NSC+OEC组长入瘢痕890μm,HSC+SC组长入瘢痕3365μm。CGRP神经纤维再生,CG组长入瘢痕600μm,NSC组长入瘢痕940μm,OEC组长入瘢痕460μm,HSC组长入瘢痕680μm,SC组长入瘢痕2090μm,NSC+OEC组未长入瘢痕,距离瘢痕头端130μm,HSC+SC组长入瘢痕3700μm。【结论】1、全横断损伤导致宿主脊髓Ⅷ、Ⅸ板层神经元死亡,残存神经元胞体萎缩。2、OEC单独移植、SC单独移植、NSC+OEC与HSC+SC联合移植组均较CG组,HSC+SC联合移植较HSC单独移植,明显提高宿主Ⅷ、Ⅸ板层神经元的存活数量,而NSC单独移植仅单独提高宿主Ⅸ板层神经元的存活。3、NSC、OEC、HSC、SC单独移植不能有效阻止Ⅷ板层神经元萎缩。而HSC+SC联合移植组分别较单独HSC或SC移植有效阻止Ⅷ板层运动神经元的萎缩。4 NSC、OEC、SC单独移植,NSC+OEC,HSC+SC联合移植(分别较各自单细胞移植)均可有效阻止Ⅸ板层神经元萎缩。5、NSC、OEC、HSC、SC单独或联合移植细胞移植有利于5-HT和CGRP轴突再生。