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目的：随着溶栓疗法、经皮腔内冠脉血管成形术、冠状动脉搭桥术等多种血运重建方法的建立和推广，缺血心肌重新获得血液供应，明显减轻了细胞损伤，提高了临床疗效。但随之而来的缺血再灌注损伤成为医学界的一个难题，研究其发生机制成为热点之一。本课题以急性心肌缺血再灌注兔模型为研究对象，观察了各组不同时间点血浆中内皮素(Endothelin，ET)、降钙素基因相关肽(Calcitoningene-related petide，CGRP)、一氧化氮(Nitrogen monoxidum，NO)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)的变化，来探讨其在心肌缺血再灌注损伤中的机制及相互间的作用，为临床治疗提供理论基础；同时利用ABS树脂和丙酮以合适的比例配成铸型剂，行冠脉铸型，从而为临床或基础实验的形态学研究探寻一种方法。
方法：由河北医科大学实验中心提供的7-9周龄兔70只，体重均为2.0kg左右，雌雄各半。随机分为A(n=20)、B(n=25)、C(n=25)三组，每组开胸后持小圆针于前降支起始后0.5cm处穿线环绕冠状动脉，其中A组仅放线但不阻断冠脉，开胸六小时后关胸，即伪手术组；B组开胸阻断冠脉6小时后血管再通行再灌注，后关胸，即再灌注组；C组开胸后永久结扎冠脉，六小时后关胸，即梗死组。开胸后均给予肝素钠1mg·kg-1，以防止阻断后冠脉内形成血栓。各组均于开胸前(T1)、关胸后12小时(T2)、24小时(T3)、48小时(T4)、72小时(T5)等五个时间点分别取静脉血5ml注入含7.5％EDTA二钠75μl和抑肽酶100μl的试管中，混匀，4℃3000rpm，离心10分钟，分离出血浆。-80℃冰箱中保存待测。将ABS树脂和丙酮以1:20的比例(即1g树脂配20ml丙酮)配制成铸型剂，实验终点处死兔子后，用注射器经冠状动脉口注入铸型剂行冠状动脉铸型，然后将兔子心脏放于37％的盐酸中腐化心肌，清水小心冲洗后，观测血管再通情况。应用北京普尔伟业生物科技有限公司提供的ET、CGRP试剂盒，放射免疫法测定各标本血浆中的ET、CGRP的浓度；用南京建成生物工程研究所提供的NO、SOD、MDA试剂盒，比色法测定各标本血浆中的NO、SOD、MDA的浓度或活力。各项数据均用均数±标准差(x±s)表示。组内及组间比较均用单因素方差分析，P＜0.05为差异具有显著性。
结果：1 冠脉铸型情况：总体成功率为97％，其中：A组均获得满意的前降支冠脉铸型；B组有一只兔子的前降支未见中下段，可能为结扎线处血栓形成，剔出研究对象，其余铸型均获得成功；C组一只兔子前降支中下段仍可见细的血管铸型，说明结扎冠脉后，仅仅造成血管狭窄，但并未完全梗死，故亦剔出研究对象，其余铸型亦完全成功。2血浆中ET的浓度变化组内比较：A组血浆中ET的浓度在五个时间点的变化无显著性(P＞0.05)；B组在关胸后12小时(T2)、24小时(T3)、48小时(T4)、72小时(T5)均较术前(T1)显著升高(P＜0.05)，但自T2后各时间点均较T2显著下降(P＜0.05)：C组关胸后各时间点均较术前(T1)显著升高(P＜0.05)，且持续到关胸后72小时(T5)。组间比较：各组血浆ET水平在T1时间点无显著区别；在T2、T3、T4、T5时间点B、C两组均较A组显著升高(P＜0.05)；在T2时间点B组较C组亦显著升高(P＜0.05)，在T3时间点B、C两组差别无显著性(P＞0.05)，但在T4、T5时间点C组均较B组显著升高(P＜0.05)。3血浆中CGRP的浓度变化组内比较：A组血浆中CGRP的浓度在五个时间点的变化无显著性(P＞0.05)；B、C两组在T2、T3、T4均较T1显著降低(P＜0.05)，但T5较T1时间点降低无显著性(P＞0.05)。组间比较：各组血浆CGRP水平在T1、T5时间点无显著区别(P＞0.05)。在T2时间点B、C两组均较A组显著降低(P＜0.05)，且B组较C组亦显著降低(P＜0.05)；在T3、T4时间点B、C两组均较A组显著降低(P＜0.05)，但B、C两组差别不显著(P＞0.05)。4血浆中NO的浓度变化组内比较：A组血浆中NO的浓度在五个时间点的变化无显著性(P＞0.05)；B组在T2、T3、T4、T5均较T1显著降低(P＜0.05)，且T3较T2显著降低(P＜0.05)，但T3、T4、T5间差别无统计学意义(P＞0.05)；C组在T2、T3、T4、T5时间点均较T1显著降低(P＜0.05)，但T2、T3、T4、T5间差别无显著性(P＞0.05)。组间比较：各组血浆NO水平在T1时间点无显著区别(P＞0.05)；在T2、T3、T4、T5时间点B、C两组均较A组显著降低(P＜0.05)；在T2时间点B、C两组差别无显著性(P＞0.05)，在T3、T4、T5时间点B组较C组显著降低(P＜0.05)。5血浆中SOD的浓度组内比较：A组血浆中SOD的浓度在五个时间点的变化无显著性(P＞0.05)；B、C两组在T2、T3、T4、T5均较T1显著降低(P＜0.05)。组间比较：各组血浆SOD水平在T1时间点无显著区别。在T2、T3、T4、T5时间点B、C两组均较A组显著降低(P＜0.05)，且B组较C组亦显著降低(P＜0.05)。 6 血浆中MDA的浓度变化组内比较：A组血浆中MDA的浓度在五个时间点的变化无显著性(P＞0.05)；B组T2、T3、T4、T5均较T1显著升高(P＜0.05)，但T5较T4显著降低(P＜0.05)；C组T2、T3、T4、T5均较T1显著升高(P＜0.05)，但自T3时间点后下降，且T5较T4显著降低(P＜0.05)。组间比较：各组血浆MDA水平在T1时间点无显著区别。在T2、T3、T4、T5时间点B、C两组均较A组显著升高(P＜0.05)，且B组较C组升高亦显著(P＜0.05)。
结论：1 ABS树脂与丙酮以合适的比例配成铸型剂，可以作为小血管铸型的理想材料，从而为相关的临床或基础实验研究提供形态学证据。2 通过对各组研究对象血浆中ET、CGRP、NO、MDA浓度及SOD活力的动态监测及比较，说明其在缺血再灌注的早期共同参与了再灌注损伤过程，故在临床上针对上述指标的变化给予相应的干预，可能会减轻再灌注损伤。3 有研究表明内皮素(ET)和降钙素基因相关肽(CGRP)在缺血再灌注损伤过程中的作用相互拮抗。本实验结果显示心肌缺血再灌注后的12小时，血浆中内皮素急剧升高，而降钙素基因相关肽下降，二者的变化趋势相反，一定程度上与上述结论吻合。其原因可能是早期产生的各种因子及代谢产物对内皮细胞产生刺激作用，促使其合成释放ET增加，同时消耗CGRP。4 一氧化氮(NO)和内皮素(ET)是一对具有拮抗效应的血管活性物质，从本实验二者的变化趋势来看，NO在介导再灌注损伤的同时，利用其拮抗内皮素的特性可能也发挥了减轻再灌注损伤的作用，但二者之间的具体关系有待进一步研究。