【摘 要】
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为了研究人干扰素-α(hIFN-α)基因的转移表达和抗HBV的作用,我们从正常人外周血单个核细胞克隆出IFN-α(α1b)全基因,并构建了表达hIFN-α基因的逆转录病毒表达载体(pDOR-hI
【出 处】
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北京医科大学 北京大学医学部 北京大学
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为了研究人干扰素-α(hIFN-α)基因的转移表达和抗HBV的作用,我们从正常人外周血单个核细胞克隆出IFN-α(α1b)全基因,并构建了表达hIFN-α基因的逆转录病毒表达载体(pDOR-hIFN-α),并导入PA317包装细胞,用NIH3T3细胞扩增法测定其假病毒颗粒滴度为1×10<'6>CFU/ml,以感染倍数(M.O.I)8:1感染NIH3TS细胞.G<,418>筛选后测定其分泌IFN-α浓度为239IU/ml/1×10<'6>/48hs,以M.O.I为16:1感染2.2.15细胞,其对HBsAg的抑制率随培养时间(2天、4天、6天和8天)的延长而逐渐增高,抑制率分别为33﹪、55﹪、55﹪和62﹪,而对HBeAg的抑制则在转染后的第2天抑制率最高,以后随培养时间延长而逐渐下降,其抑制率分别为67.7﹪、40﹪、19.5﹪、25.3﹪.而对照对HBsAg第2、4、6、8天的抑制率分别为0﹪、10.8﹪、0﹪和13﹪,对HBeAg的抑制率分别为0﹪、0﹪、0﹪和1.2﹪.而且,对HBVDNA亦有明显的抑制作用,抑制率达66﹪;而对照(pDOR组)抑制作用不明显.提示hIFN-α基因可以成功地转移和表达,并有抑制HBV复制和表达的作用.
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