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目的 构建人巨细胞病毒(HCMV) pp150的原核高效表达系统，制备用于活动性HCMV感染血清学诊断的基因工程抗原。 方法 利用DNA Star软件设计HCMV AD169株pp150基因片段引物，并引入EcoR1酶切位点和HindⅢ酶切位点。PCR扩增HCMV pp150抗原决定簇(840-1048aa)编码基因片段；目的基因分别与原核表达载体pMAL-p2、pET-28a连接，转化宿主菌E.coli.；IPTG诱导表达，经SDS-PAGE电泳检测表达情况；表达的融合蛋白经麦芽糖亲和层析树脂纯化；以Western-blot鉴定其抗原性，检测了15份HCMV IgM阳性血清；重组抗原包被ELISA板，检测了263份正常孕妇血清。 结果 PCR扩增获得630bp大小的目的基因片段。重组质粒pMAl-p2-pp150与pET-28a-pp150经EcoR1和HindⅢ双酶切，分别切出一630bp的预期片段，表明重组正确。重组表达质粒pMAl-p2-pp150可在E.coli.DH5α中有效表达，表达产物为麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白，SDS-PAGE电泳后经凝胶成像系统分析，分子量为64KDa，约占菌体蛋白的10％。而重组质粒pET-28a-pp150未见明显表达带。表达产物经麦芽糖亲和层析树脂纯化后可见单一的64KDa蛋白条带。Western blot检测，阳性识别率为80％(12／15)。用此蛋白包被ELISA板，检测正常孕妇血清，阳性率为6.5％(17／263)。与本室制备的全病毒抗原ELISA的诊断符合率为96％。 结论 此重组蛋白具有良好的抗原性，进一步完善后用于HCMV急性和／或活动性感染的诊断。