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目的：本实验通过体外培养人牙周膜细胞(periodontal ligament cells，PDLCs)，继而将成骨生长肽(osteogenic growth peptide，OGP)和胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-Ⅰ，IGF-1)单独或联合作用于人PDLCs，观察人PDLCs增殖情况、细胞内碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)活性变化情况和总蛋白含量的变化情况，以探讨两种生长因子单独或联合应用对体外培养的人PDLCs的作用效果，为其在牙周病临床治疗中的应用提供理论依据。
方法：1．人PDLCs的体外培养及鉴定：取临床上12～18岁因正畸需要拔除的牙周健康、无龋的新鲜前磨牙，用刀片刮取牙根中1/3的牙周膜组织，组织块法培养人PDLCs。取第3代细胞用sABC法进行波形丝蛋白(Vimentin)及角蛋白(Kerati)免疫组化染色，予以细胞来源鉴定。
2．将OGP与IGF-1单独作用于人PDLCs，培养3天后用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)观察人PDLCs增殖活性的情况，统计分析后选出OGP与IGF-1对人PDLCs起作用的最大显效浓度和最小显效浓度。
3．将测出的OGP与IGF-1的最大显效浓度与最小显效浓度分别或联合作用于人PDLCs，于培养的第1、3、6天，用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)法检测细胞增殖情况，测定吸光度值(A值)，进行组间比较；用碱性磷酸酶检测试剂盒检测细胞内ALP活性，测定吸光度值(A值)，进行组间比较；用考马斯亮蓝比色法检测细胞内总蛋白含量，测定吸光度值(A值)，进行组间比较。
结果：1．利用组织块法培养第7～9天时，有细胞从组织块中游离出来，免疫组化染色显示细胞波形丝蛋白染色阳性，角蛋白染色阴性。
2．培养第3天时，OGP不同浓度实验组的细胞吸光度值与对照组比较均具有差异(p＜0.05)最大显效浓度为10-9mol/L，最小显效浓度为10-11mol/L。
3．培养第3天时，IGF-1不同浓度实验组的细胞吸光度值与对照组比较具有差异(p＜0.05)最大显效浓度为100ng/ml，最小显效浓度为1ng/ml。
4.OGP与IGF-1联合作用于人PDLCs，促增殖作用较对照组有显著差异(P＜0.05)，并且与两种生长因子在相同浓度单独应用时比较相差亦显著(P＜0.05)。促增殖作用从第1天开始，一直持续至第6天。
5.OGP与IGF-1联合作用于人PDLCs，无论在细胞培养液中还是在细胞裂解液中，测得ALP活性的A值与对照组比较均有显著差异(P＜0.05)，并且与相同浓度时单独应用组相差亦显著(P＜0.05)。促ALP活性增强作用从第1天开始，一直持续至第6天。
6.OGP与IGF-1联合作用于人PDLCs，测得细胞内总蛋白含量的A值与对照组比较均有显著差异(P＜0.05)，而且与相同浓度时单独应用组相差亦显著(P＜0.05)。促总蛋白含量增加作用从第1天开始，一直持续至第6天。
结论：1.本实验结果证明OGP单独作用可以促进人PDLCs增殖，细胞内ALP活性增强，总蛋白含量增加。
2．本实验结果证明IGF-1单独作用可以促进人PDLCs增殖，细胞内ALP活性增强，总蛋白含量增加。
3．本实验结果证明OGP与IGF-1联合作用不仅可以促进人PDLCs增殖，细胞内ALP活性增强，总蛋白含量增加，并且两种生长因子联合具有协同作用。