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目的:慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)的患病率和死亡率逐年增高,已成为全球关注的重要公共卫生问题之一。Klotho是与CKD的发生及进展关系密切的基因,预防Klotho下降,再激活内源性Klotho产生或补充外源性Klotho能够减轻肾脏纤维化,延缓CKD进展,可作为CKD潜在的治疗靶标。尿毒清(uremic clear granules,UCG)是治疗CKD的有效中药复方制剂,具有多成分、多靶点、多途径协同作用的特点,药理机制复杂,有关的深入研究依然比较匮乏。本课题通过5/6肾切除法制备CKD大鼠模型,研究UCG对CKD大鼠肾功能及肾脏纤维化的作用及作用机制,探索UCG是否可能通过调节内源性Klotho的表达发挥药理作用,以完善UCG的药理机制。方法:随机将36只SD大鼠分成三组:假手术组(Sham组,行假手术);模型组(Model组,5/6肾切除+高磷饮食);尿毒清组(UCG组,5/6肾切除+高磷饮食组+尿毒清颗粒);采用5/6肾切除法构建大鼠CKD模型,于术后2周、4周、8周、12周采血,检测各组大鼠血清生化指标:肌酐(SCr)、尿素氮(BUN);造模手术后12周取肾组织,一部分用于Western Blot及RT-PCR方法检测肾组织中Klotho、TGF-β 1、α-SMA、FN等蛋白和mRNA的表达量;另一部分行HE染色、Masson染色及免疫组织化学检测。结果:一般情况:模型组大鼠术后皮毛逐渐变得枯黄杂乱并且容易脱毛,精神萎靡,UCG组上述表现较轻;术后12周UCG组残余肾重和肾脏指数明显低于模型组(P<0.05)。肾脏外观:正常组大鼠的肾脏外表红润光滑,模型组大鼠残余肾脏明显增生肿大,表面苍白缺血,肾盂高度扩张(内有积尿),UCG组有所改善。血清生化指标:术后2周造模的各组大鼠BUN及Scr显著增高,并且模型组BUN及Scr持续升高,尿毒清干预能够维持大鼠肾功能,给药10周后UCG组BUN及Scr水平显著低于模型组(P<0.001)。肾组织HE染色及Masson染色:造模大鼠肾脏组织不同程度的损害,UCG组肾脏病理损害情况相对模型组有所改善。病理图像定量分析:造模的各组大鼠肾脏组织病理学积分均显著高于假手术(P<0.001);UCG组肾小球及肾小管的病理损害程度均低于模型组(P<0.05)。Western Blot及RT-PCR结果:UCG组Klotho的表达高于模型组(P<0.05);UCG组TGF-β1、α-SMA、FN的表达水平低于模型组(P<0.05)。免疫组化结果:模型组大鼠肾组织Klotho表达降低,UCG能部分上调Klotho表达。结论:UCG能够改善5/6肾切除大鼠肾功能,减轻肾脏纤维化,延缓CKD进展;尿毒清可能通过上调保护性分子KLotho表达,下调肾损伤性分子TGF-β 1的表达,下调EMT相关分子α-SMA及FN表达,抑制肾小管上皮转分化,缓解肾脏纤维化。