基于宏基因组学的慢性乙型肝炎患者肠道微生态干预疗效研究

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目的:了解慢性乙型肝炎患者肠道菌群特点,比较慢性乙型肝炎不同疾病进展状态包括慢性HBV携带者、慢性乙肝急性发作者、乙肝肝硬化患者以及乙肝相关肝癌患者的肠道微生态特点,以寻找与疾病不同严重程度相关的菌群及功能基因。在此基础上,使用肠道微生态制剂治疗慢性乙肝急性发作者,评估干预措施对HBVDNA、HBe Ag清除率及肝功能变化的影响,并且比较治疗前后患者肠道微生态的改变,探讨肠道微生态制剂治疗对慢性乙型肝炎的疗效。材料与方法:第一部分横断面研究:自2017年2月至2018年1月,入组慢性HBV感染受试者43人,包括慢性HBV携带者6例,慢性乙肝急性发作者17例,乙肝肝硬化患者14例,乙肝相关肝癌患者6例,患者均来自树兰(杭州)医院。采集患者粪便标本进行宏基因组学检测,比较不同组患者肠道微生态。第二部分前瞻性队列研究:自2018年2月至2019年3月,入组慢性乙肝急性发作者214人,患者来自浙江省内7家医院。根据自愿原则,38名被试者进入无肠道微生态干预的对照队列,176名被试者根据随机分组原则:干预组1:益生菌制剂2g QD,连续服用6个月;干预组2:益生菌制剂2g BID联合益生元制剂10g BID,连续服用3个月;干预组3:益生菌制剂2g BID联合益生元制剂10g BID,连续服用6个月。分别收集以上慢性乙型肝炎患者治疗前及治疗后3月、6月、9月的血清及粪便标本,采用荧光定量PCR检测血清中的HBV-DNA,全自动生化仪检测:总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)、谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST),对慢性乙型肝炎患者治疗前后肠道菌群变化进行宏基因组学分析。结果:1.与发生肝硬化和肝癌的晚期患者相比,慢性HBV携带者肠道内富集了更多普拉梭菌、柔嫩梭菌、双歧杆菌和巴恩斯氏菌等有益菌群。当慢乙肝进展到疾病后期阶段时,肠道中克雷伯杆菌属、肠杆菌属和埃希菌属等病原微生物比例增加。值得注意的是,乙肝相关肝癌患者的肠道似乎有富集某些病毒的倾向。2.使用益生菌制剂(长双歧杆菌,瑞士乳杆菌)或合生元制剂(长双歧杆菌,瑞士乳杆菌,菊粉)3-6个月,未显著改善慢性乙型肝炎患者肝功能、HBV-DNA定量等临床指标。3.慢性乙型肝炎患者在抗病毒的同时,连续口服合生元制剂(长双歧杆菌,瑞士乳杆菌,菊粉)6个月时可明显增加粪便中双歧杆菌属和乳杆菌属的相对丰度。结论:慢性乙型肝炎患者不同进展阶段存在不同程度的肠道微生态失衡。合生元制剂可一定程度改善患者的肠道菌群失调。
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