【摘 要】
：
MicroRNA是一类位于基因组非编码区或基因内含子位置的内源性非编码小分子RNA,一般通过作用于基因的3’UTR引起mRNA降解或翻译受阻来参与基因的表达调控。本课题组前期对7周
论文部分内容阅读
MicroRNA是一类位于基因组非编码区或基因内含子位置的内源性非编码小分子RNA,一般通过作用于基因的3’UTR引起mRNA降解或翻译受阻来参与基因的表达调控。本课题组前期对7周龄的隐性白羽洛克和杏花鸡胸肌两尾样进行miRNA测序发现miR-205a是差异上调的,同时在杏花鸡11胚龄、16胚龄、1日龄的腿肌高通量测序中发现miR-205a和CDH11基因也是差异上调表达的。因此本文选取miR-205a和CDH11基因作为候选研究对象探讨二者在成肌细胞中所发挥的作用,同时试图挖掘miR-205a的自身表达调控的分子机制。通过流式细胞术和EdU细胞增殖检测我们发现miR-205a能够抑制QM-7细胞和原代成肌细胞的增殖,MyHC免疫荧光的染色结果显示miR-205a能够促进原代成肌细胞的肌管形成以及MyHC基因的表达。通过生物信息学预测到CDH11为miR-205a的靶基因,通过双荧光报告系统验证miR-205a能够结合CDH11 3’UTR从而抑制该基因的表达,定量的结果也表明miR-205a能够在转录后水平负调控CDH11的表达。流式细胞术和EdU细胞增殖检测实验结果表明CDH11能够促进QM-7细胞和原代成肌细胞的增殖,与miR-205a的结果正好相反,同时MyHC免疫荧光镜检结果、肌管面积的统计结果以及定量结果显示CDH11能够抑制原代成肌细胞的分化以及分化相关基因MyoD、MyoG、MyHC的表达。同时我们对pre-miR-205a上游序列构建了一系列的miR-205a 5’缺失启动子片段,通过双荧光活性测定找到了潜在的启动子活性区域。我们在启动子活性区域通过生物信息学预测到两个可能结合的转录因子HNF-1和MyoG/NF-1,通过构建缺失型载体和其结合位点进行突变,我们发现这两个转录因子确实能够显著抑制和促进miR-205a的转录活性。综上,本研究揭示了miR-205a在成肌细胞中的功能和其自生的调控机制,为miRNA调控骨骼肌增殖分化提供了新的数据。
其他文献
我国设施蔬菜产业发展迅速,其中番茄已成为设施种植中的主要作物。由于设施内环境温度较高、湿度较高、空间密闭,因此设施番茄在生长过程中会受到多种病害的危害,影响其产量与品质。在防治病害过程中,过多使用化学药剂,导致病原菌产生抗性、环境污染及投资投工过大。微酸性电解水是一种具有高效、快捷、易分解、不产生抗药性等特点的杀菌剂,其应用已深入到生活的各个领域。然而,微酸性电解水对植株的安全使用浓度及对病害的防
猪体细胞克隆技术,又称体细胞核移植技术,在农业生产、疾病动物模型制备、重编程机制研究、人类生物医药学等领域具有非常重要的应用价值。然而,猪克隆胚胎发育至出生的效率
随着我国标准化体制改革的全面深化与标准体系的进一步完善,团体标准在我国市场经济发展水平提高的过程中发挥着越来越重要的作用。团体标准的制定者与使用者是团体标准的核心利益主体,团体标准制定者与使用者之间利益分配的均衡与公正,是团体标准可持续发展的重要前提。然而,我国团体标准利益分配的现实情境,却存在团体标准利益分配的失衡困境,阻碍了团体标准的进一步发展。本研究首先对团体标准利益失衡问题的表现及其原因进
高速铁路运输能力强,速度快,安全性好,绿色环保,是一种技术经济优势明显的运输方式。但随着列车运行速度的不断提高,对车轮与轨道匹配性能的要求越来越高,踏面磨耗会改变轮轨
本论文建立了超高效液相色谱-三重四级杆质谱法同时测定芹菜根、茎、叶、植株中吡虫啉、唑螨酯的残留量。研究了吡虫啉、唑螨酯在芹菜根、茎、叶、植株中的残留动态规律,及其
随着城市化水平的发展,传统的户籍制度、福利分房制度瓦解,市场化的商品住宅制度开始产生。在制度改革和市场转型的背景下,城市的空间结构经历着向外扩张和内部重组的过程,传统的相对稳定的职住平衡局面被打破,职住分离现象开始在我国出现,在大城市中表现尤为明显。保障房居民是城市中的弱势群体,他们依赖政府提供住房来满足自身的居住需求,然而,市场逐利的机制使得保障房居民被动安置到城市外围区。单中心的城市结构下,保
突变风作用下列车通过路堤时,高速列车车体周围的流场会较平地发生较大变化,此时列车要比平地运行时更容易发生脱轨事故。自然条件下的风速是随时间推移产生变化,呈现出波动
目前国内大部分地区为了巩固地方性疾病防治的成果,为广大群众的身体健康打下更加坚实的基础,国家卫健委等十个部门统一印发了《地方病防治专项三年攻坚行动方案(2018—2020年)》,重点执行防控措施强化等行动,加强基层执行力度,加强地方性疾病防治工作,为打赢脱贫战役助力。推动社会变革的重要力量之一就是信息的传播,其在地方性疾病防治推广的过程中也扮演着重要的角色。在这数十年的不懈努力后,巴彦淖尔地区的地
随着环境污染和能源消耗问题日趋严重,插电式混合动力汽车(Plug-in Hybrid Electric Vehicle,PHEV)作为传统汽车向纯电动汽车过渡的产物,因其具有较好的节能减排性能,而受到
蓝药睡莲(Nymphaea stellata Willd.)是一种生长在湖泊和河岸的热带鲜花草本植物,目前主要应用于鲜切花的观赏,在其他方面应用较少,而鲜切花保质期短,容易造成浪费严重。作为