【摘 要】
：
该试验为了细致研究SV40T致瘤过程中Rb、p53基因的具体作用,构建了两种含有SV40T不同区段的外源基因:Rb结合域点突变的SV40T基因(SV40T-DRb)和无p53结合域的SV40T基因(SV40T-
论文部分内容阅读
该试验为了细致研究SV40T致瘤过程中Rb、p53基因的具体作用,构建了两种含有SV40T不同区段的外源基因:Rb结合域点突变的SV40T基因(SV40T-DRb)和无p53结合域的SV40T基因(SV40T-Dp53).建立这两种基因的转基因小鼠,为探讨SV40T致瘤过程中p53和Rb的作用提供工具.试验成果如下:1.利用分子生物学的基因克隆手段,将改造的SV40T基因片段克隆测序.SV40T-DRb基因的测序结果表明,在位于Rb结合域中的第109位氨基酸发生了突变(E→V),其它氨基酸则无变化.SV40-Dp53基因的测序结果表明,与正常基因核苷酸对比的同源性达98％.2.将测序后的SV40T-DRb基因和SV40T-Dp53基因克隆进乳腺特异性表达载体p205C3中,运用雄原核显微注射法制备转基因小鼠.先后共计注射862枚小鼠受精卵,移植360枚注射后存活的小鼠受精卵,使用35只假孕受体母鼠,有23只受孕,共出生127只小鼠.3.转基因小鼠出生后,用PCR方法检测出6只双阳性转基因(同时检测到SV40T-DRb和SV40T-Dp53两种基因)小鼠,为了避免PCR技术造成的假阳性,用Southern blot方法检测出1只双阳性转基因小鼠(♂).4.F<,0>代转基因小鼠繁殖交配后,获得25只F<,1>代小鼠,经PCR检测证明转基因携带率为50％(16/25),符合孟德尔遗传规律,证明外源基因可稳定地传至后代.试验结果证明该试验构建的两种转SV40T不同区段的策略是成功的,其建立的阳性转基因小鼠模型将为该实验室具体研究SV40T致瘤过程中Rb、p53基因的作用提供有用的工具.
其他文献
现如今,随着我国经济的快速发展,桥梁工程的建设发展的也十分迅速.针对目前桥梁吊装施工技术应用过程中存在的问题,通过实际工程案例进行研究,对该工程概况进行简要介绍.针对
随着我国社会主义市场经济的不断发展,社会各界对我国建筑工程高度关注,为了提高房屋建筑的建设质量,加强对建筑工程监理质量非常重要.作为影响工程质量的关键因素,房屋建筑
现阶段,我国城市化进程不断加快,土木工程在我国发展过程中贡献了极大的力量,完善了我国的各项基本设施,加大房屋修建力度,提高了人们的生活水平.随着建筑规模的不断扩大,人
建筑行业在当代社会背景下的稳定发展,受到了人们的广泛关注和重视,特别是建筑工程在规划和建设时,施工质量一直以来都是其中非常重要的一部分.建筑工程施工质量的高低,不仅
考虑到混凝土桥梁使用中需要面临铺装层损坏、桥头跳车、混凝土开裂和钢筋腐蚀等病害问题的威胁,为使其自身的使用安全和使用寿命得到保障,应采取合理的养护管理措施防治上述
锂离子电池是目前电动汽车最有效的能量存储体系。其中的尖晶石 LiMn2O4因具有矿资源丰富、价格低廉、环境友好以及安全性能高等优点而成为最有前景的锂离子电池正极材料之一
随着经济的不断进步,我国道路事业不断发展,沥青作为高速公路建设中的重要原材料之一,具有水溶性低、不可渗透的特点,对于地面平整性和美观性的提升有很大的帮助.随着人民生
在桥梁施工工作中,预应力混凝土连续桥梁具有跨度大、结构对称的特点.基于现阶段可以使用的施工技术方法种类较为丰富,施工人员需要结合桥梁施工工作的基本流程,明确每个环节
脂多糖是革兰氏阴性细菌主要的表面成分,由内到外包括类脂A,核心多糖和O-抗原.O-抗原是细菌细胞最主要的表面抗原,由重复寡糖单位组成的多聚糖.由于受到选择压力的影响,细菌
甲型肝炎是由一种经由肠道传染的病毒即甲型肝炎病毒（HAV）感染肝脏细胞而引起的急性传染病，是严重威胁人类健康的世界性传染病。转基因植物食用疫苗具有接种简便、成本低廉的优