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I电化学方法和电致化学发光方法是最近几年热门的两种分析方法,其高灵敏度,检测范围宽,背景信号低,操作简单等优点使得它们得到快速的发展。本论文合成不同种纳米粒子,制备生物识别探针,结合DNA酶信号放大技术、表面增强方法、抗污染技术、分子内自增强方法等,设计了三种新型电化学生物传感器,实现对microRNA、凝血酶的高灵敏、高选择性检测,内容如下:（1）制备纳米粒子和双链特异性核酸酶（DSN）双重信号放大的电化学核酸传感器检测microRNA。利用DSN酶特异性剪切DNA链的特点,在离心管中进行一步反应,实现了microRNA的灵敏检测。通过在磁珠上连接修饰有CdS量子点的DNA探针,与靶标microRNA杂交形成双链结构。当有DSN酶存在时,特异性识别并剪切双链中的DNA,microRNA游离到溶液中,进行下一次杂交和剪切,通过多次循环实现信号的指数级放大。同时,由于信号分子CdS量子点溶解后可释放出大量的Cd2+,能够进一步放大响应信号,通过阳极溶出伏安法（DPASV）对其进行检测,得到的电化学信号与靶标microRNA的浓度成线性关系,并对细胞提取液中的microRNA进行检测,其线性范围为0.00110000pM L-1,检测限低至0.48fM L-1。（2）构建一种基于Ru（bpy）32+-TPA的电致化学发光适体传感器检测凝血酶。在电极表面修饰Au@SiO2作为反应基底,通过SiO2的硅烷化连接捕获探针。凝血酶适体与辅助DNA部分杂交修饰在磁珠上,当体系中有凝血酶存在时,辅助DNA被置换出来,并与固定在反应基底上的捕获DNA以及连有Ru-SiO2的信号DNA形成刚性“T”型结构,使得Ru-SiO2更加接近电极表面,通过Au@SiO2表面增强Ru（bpy）32+的ECL信号,检测被置换的DNA浓度从而实现PBS及血清中凝血酶的检测,得到的ECL信号与凝血酶的浓度成线性关系,线性范围为0.110000pM L-1,检测限低至0.052pM L-1。（3）利用树枝状大分子PAMAM和Ru（dcbpy）32+通过酰胺化反应形成自增强的发光试剂（Ru-PAMAM）。同时,在涂有金纳米粒子（AuNPs）的电极上聚合3,4-乙烯二氧噻吩（PEDOT）/乙二醇（PEG）复合材料。通过适体与凝血酶的特异性结合,利用PEDOT超高的导电性,稳定性以及PEG良好的生物相容性,抗污染性,制备表面抗污染的凝血酶电致化学发光生物传感器。通过检测适体上标记的Ru-PAMAM的ECL信号从而灵敏地对凝血酶进行生化分析,并在血清等复杂的实际样品中重复检测,线性范围为0.110000pM L-1,检测限低至0.034pM L-1。