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泰勒虫是一种经由蜱传播的一类血液寄生原虫,它的爆发会给全球畜牧业造成了严重的经济损失。在泰勒虫的流行病学调查、分类、以及致病性研究等方面,相关报道较多,而在其基因组,转录组,蛋白组等方面的文献报道极少。本研究选取了6株致病力较强的羊泰勒虫种株作为研究对象进行蛋白质组学分析,通过iTRAQ技术测定了吕氏泰勒虫及尤氏泰勒虫种内及种间的差异表达蛋白,并针对一些重要的功能性蛋白进行了初步分析及转录水平的验证,分别提交并公布了吕氏泰勒虫及尤氏泰勒虫的全蛋白质组学数据库,并针对一些与泰勒虫能量代谢相关的蛋白进行了讨论。为此我们进行了以下研究工作：1、对吕氏泰勒虫与尤氏泰勒虫两个种的六个地方株进行了裂殖子的培养；随后利用所建立的免疫亲和层析柱的纯化方法对虫体进行提纯,尽可能除去红细胞碎片及其他杂质,从而得到较为纯净的蛋白质组学研究材料。随后,建立了一种能够同时鉴定三种羊泰勒虫的多重PCR方法,对所培养的虫种进行了快速的鉴定与分类。2、利用iTRAQ技术对两种羊泰勒虫的差异表达蛋白进行了分析,超过670个蛋白被鉴定出,将这些蛋白按照功能进行分类,其中与细胞进程相关蛋白有29.78%,与代谢相关蛋白有28.80%,与生物调节相关的蛋白有5.00%。吕氏泰勒虫与尤氏泰勒虫两物种间共有71个差异表达蛋白被鉴定,其中吕氏泰勒虫有39个高表达蛋白,而尤氏泰勒虫有32个高表达蛋白。我们特别关注了数个与毒力及入侵相关的蛋白,包括半胱氨酸蛋白酶、丙酮酸激酶、乳清酸磷酸核糖转移酶、组蛋白脱乙酰酶等。我们通过实时荧光定量核酸扩增检测系统(QPCR)的方法在转录水平上对这些蛋白进行了验证。验证结果与iTRAQ基本相同。这是首篇关于羊泰勒虫差异蛋白组学方面的研究。这些数据结论很可能为我们理解两个物种的代谢、发育、毒力、免疫、分类等方面的差异提供一定的理论依据,同时也希望为我国羊泰勒虫病的综合防控提供一些新的策略。3、通过蛋白全谱测序,吕氏泰勒虫我们共鉴定出485个蛋白,而尤氏泰勒虫则鉴定出321个蛋白,将这些蛋白进行功能聚类分析后,对能量代谢及入侵相关蛋白进行了讨论,这些研究为我们了解泰勒虫的基础能量代谢提供了一定依据。这是首次关于尤氏泰勒虫及吕氏泰勒虫蛋白全谱分析和鉴定的研究。所有测定的蛋白质组学数据被上传到了蛋白公开访问资源数据库EuPathDB(www.eupathdb.org),大量的基于质谱技术所测得的吕氏泰勒虫与尤氏泰勒虫的蛋白表达数据,以及这些寄生虫的转录组、基因组数据都可以通过此网站进行查询。