【摘 要】
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该研究采用高效免疫方法,利用rhG-CSF免疫BALB/C小鼠.经过两次融合,制备了三株抗rhG-CSF的单克隆抗体,分别命名为1H、2B、2C.其抗体类型均为IgG2a.免疫印迹试验证明为特异性
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该研究采用高效免疫方法,利用rhG-CSF免疫BALB/C小鼠.经过两次融合,制备了三株抗rhG-CSF的单克隆抗体,分别命名为1H<,11>、2B<,3>、2C<,3>.其抗体类型均为IgG2a.免疫印迹试验证明为特异性抗G-CSF的单克隆抗 体.单抗相加试验和单抗竞争试验表明三株单抗针对G-CSF两个不同的抗原决定簇.中和试验表明2B<,3>,2C<,3>识别的位点与G-CSF刺激NFS-60增殖活性有关.该研究利用此两株针对不同抗原定簇的单克隆抗体,建立了双抗夹心ELISA方法.此方法特异性较好,检测灵敏度为340pg/ml.用此法检测了12例细菌感染病人,有11例病人G-CSF检测阳性,阳性率91.6%;白血病病人血清G-CSF阳性率25%-35.7%;正常人血清则均为阴性;此方法克服了以往骨髓细胞集落形成法和G-CSF依赖株测定法需时长、操作繁琐的缺点,为研究正常人和某些疾病状态下病人外周血G-CSF浓度的变化和G-CSF的药代动力学提供了一个简便、快速、特异性高的方法.
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