【摘 要】
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目的：由于淋巴瘤小病灶、早期局限病灶检出率较低，对治疗后肿瘤微小残留灶(MRD)的检测和肿瘤复发的鉴别有很大的局限性，同时对于病灶隐匿或处于机体深部而患者不能耐受或不愿手术取组织活检的，给临床诊断造成极大的困难。基于此，利用SELDI技术对淋巴瘤患者和正常对照的血清蛋白质进行检测，通过Biomarker Wizard 3.1系统软件对蛋白质丰度和质荷比(M/S)进行分析，期望筛选出可用于临床淋巴瘤
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目的：由于淋巴瘤小病灶、早期局限病灶检出率较低，对治疗后肿瘤微小残留灶(MRD)的检测和肿瘤复发的鉴别有很大的局限性，同时对于病灶隐匿或处于机体深部而患者不能耐受或不愿手术取组织活检的，给临床诊断造成极大的困难。基于此，利用SELDI技术对淋巴瘤患者和正常对照的血清蛋白质进行检测，通过Biomarker Wizard 3.1系统软件对蛋白质丰度和质荷比(M/S)进行分析，期望筛选出可用于临床淋巴瘤早期诊断和病情监测的特异性血清生物标记，并进一步对淋巴瘤患者和正常对照之间有显著差异的血清蛋白质峰进行优选，建立数据库，结合人工神经网络(ANN)建立诊断模型，从而突破传统的应用组织活检才能确诊淋巴瘤的技术瓶颈。
方法：运用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测14例霍奇金淋巴瘤(HL)，其中初诊患者9例(男6例，女3例)；化疗后(ABVD方案化疗大于或等于4个周期)患者5例(男性)，45例非霍奇金淋巴瘤(NHL)，其中初诊患者38例，(男26例，女12例)，包括B细胞来源NHL(B-NHL)25例，T/NK细胞来源NHL(T/NK-NHL))3例，T细胞来源NHL(T-NHL)10例；化疗后(CHOP方案化疗大于或等于4个周期)患者7例(男4例，女3例)，均为B细胞来源NHL患者，以及21例正常对照(男14例，女7例)的血清，用CM10蛋白芯片获得血清蛋白表达指纹图谱，并用Biomarker Wizard 3.1软件对检测数据进行分析，得到的数据进行初步的统计学分析(计算均值X-、P值和标准差S)，P<0.05被认为差异具有统计学意义。从初诊淋巴瘤组和正常对照血清蛋白质指纹图谱的具有明显差异的质荷比中，优选出4种蛋白质，应用BP人工神经网络建立淋巴瘤神经网络诊断模型。
结果：
1．初诊淋巴瘤患者和正常对照的血清间有77个差异表达蛋白质荷比峰(P<0.05)，其中35个蛋白有明显差异(P<0.001)，有8个蛋白质峰在淋巴瘤血清中高表达，27个蛋白质峰低表达。高表达的蛋白质M/Z分别是，15 191、8 733、8 249、6 680、8 172、8 812、6 911和13 803。
2．初诊HL和NHL患者血清蛋白质指纹图谱间仅有M/Z为8 625和9 471有统计学差异(P<0.05)，这两种蛋白质均在NHL高表达。
3．初诊B-NHL和T-NHL患者的血清蛋白质指纹图谱没有发现统计学差异(P>0.05)。
4．初诊T/NK-NHL和T-NHL患者的血清蛋白质指纹图谱间有3个差异表达蛋白质(P<0.05)，M/Z分别是8004、10 685和16 150，均在T-NHL血清中高表达。
5．初诊B-NHL和化疗后B-NHL患者的血清蛋白质指纹图谱组间有7个蛋白质表达有统计学差异(P<0.05)，均在化疗后NHL高表达。
6．初诊HL和化疗后HL患者的血清蛋白质指纹图谱间有31个蛋白质表达有统计学差异(P<0.05)，其中有25个蛋白质在化疗后HL血清高表达，有6个蛋白质低表达。
7．BP人工神经网络模型诊断淋巴瘤的灵敏度82.98％，特异度90.48％，诊断指数 (DI) 173.46％,Youden指数73.46％，阳性预测值95.12％，阴性预测值70.37％。
结论：
1．淋巴瘤和正常对照血清蛋白质组学水平有显著差异。
2．初诊HL和NHL以及初诊T/NK-NHL和T-NHL血清蛋白质谱之间存在差异蛋白，由于我们实验标本例数有限，需进一步扩大样本研究和验证。
3．初诊和化疗后淋巴瘤血清蛋白质组学水平有显著差异，SELDI-TOF-MS技术可能为淋巴瘤MRD的检测提供新的方法。
4．SELDI-TOF-MS技术可能是寻找淋巴瘤血清生物标志物和诊断淋巴瘤的有效工具。
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