【摘 要】
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目的：模拟自然界风寒湿刺激建立痹证动物模型，研究椎间盘及膝关节形态学特征，椎间盘组织中PLA和TXB含量变化，MMP-1和MMP-3mRNA 的表达，运用基因芯片技术和多元统计学方法研究风寒
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目的：模拟自然界风寒湿刺激建立痹证动物模型，研究椎间盘及膝关节形态学特征，椎间盘组织中PLA<,2>和TXB<,2>含量变化，MMP-1和MMP-3mRNA 的表达，运用基因芯片技术和多元统计学方法研究风寒湿相关的基因表达谱的改变，揭示不同程度和不同类型痹证的本质差异。
方法：选择2月龄SPF级昆明种小鼠，模拟自然界不同强度风寒湿刺激造模，给予每日刺激3小时，连续重复刺激2个月。颈椎间盘和膝关节取材后，HE、Toluidine blue和Safranin O染色，形态学评分和软件分析结果；ELISA方法测定PLA<,2>和TXB<,2>的含量；Real-time RT-PCR法检测MMP-1和MMP-3mRNA的表达；cDNA探针与12张BiostarM140s芯片杂交，结果经生物信息学处理，多元统计分析。
结果：颈椎间盘和膝关节软骨细胞排列紊乱，数量和质量下降，基质着色力差，不均匀，出现双潮线，非钙化层和钙化层比值降低。椎间盘见到纤维环板层结构的破坏。对12张芯片进行生物信息学处理后，建立了风寒湿痹证功能基因谱一级、二级、三级数据库。12张芯片中有表达差异的基因(≥7张)共计74条，并根据 NCBI 数据库检索结果分为三大类：已知功能的基因、可推测功能的基因和未知功能的基因。与正常对照组相比，轻度痹和痛痹模型组PLA<,2>含量升高，差异有统计学意义(p<0.05)；中度痹模型组TXB<,2>含量升高，差异有统计学意义(p<0.05)。Real time RT-PCR法检测发现，与正常对照组相比，轻度痹和中度痹组椎间盘组织中 MMP-1 mRNA表达增高，差异有统计学意义(p<0.01)，痛痹模型(p<0.05)也有增高；与正常对照组相比，各模型组MMP-3 mRNA表达虽有升高的趋势，但差异无统计学意义(p>0.05)。
结论：
1、从形态学上证实了一定量的风寒湿刺激可以导致小鼠颈椎间盘和膝关节退行性改变。
2、风寒湿刺激初期可导致PLA<,2>、TxA<,2>分泌的升高，风寒湿刺激的晚期，属于中医辨证的肝肾亏虚期，机体对外界的刺激产生反应的能力下降，具体表现为PLA<,2>和TXB<,2>的水平有下降趋势。
3、风寒湿刺激初期可导致MMP-1 mRNA的表达增高，而在风寒湿刺激的晚期，MMP-1mRNA的表达水平出现下降趋势。
4、运用芯片技术和聚类分析法建立了风寒湿痹证候功能基因数据库。
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