【摘 要】
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高等植物光系统(PS)Ⅱ是光合作用捕获能量与调控的关键部位,PSⅡ利用捕光天线捕获的光能裂解水释放出氧气,并在反应中心发生电荷分离并启动光合作用的电子传递过程。由于其在光
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高等植物光系统(PS)Ⅱ是光合作用捕获能量与调控的关键部位,PSⅡ利用捕光天线捕获的光能裂解水释放出氧气,并在反应中心发生电荷分离并启动光合作用的电子传递过程。由于其在光合作用能量交换中的重要性,PSⅡ的结构和功能的关系及其调控机理是光合作用研究中的热点。PSⅡ由反应中心和捕光天线两部分组成,PSⅡ的外周捕光天线系统包括大量天线(LHCⅡ)和微量天线,微量天线位于PSⅡ核心复合物和LHCⅡ之间,本研究旨在阐明微量天线在PSⅡ超分子复合物结构与功能中的作用。 从豌豆(Pisum sativum L.)叶片中提取了两种具有完整功能的PSⅡ核心复合物:PSⅡ粗核心复合物(MCC)和PSⅡ核心复合物(CC)。蛋白组分及光谱分析证明,MCC含有所有的微量天线和少量LHCⅡ,CC则不含有任何外周天线。在不同光强下测量其放氧活性,结果证明两种核心复合物都具有较高的光化学活性。另外分离纯化LHCⅡ,并通过LHCⅡ分别与MCC和CC体外蛋白脂质体重组的方法研究了微量天线在LHCⅡ到PSⅡ核心复合物能量传递中的功能。 本文利用去垢剂介导法将两种PSⅡ核心复合物单独或者分别与LHCⅡ共同重组到含有四种类囊体膜脂的脂质体中,并对蛋白脂质体进行了一系列生化特性分析:(1)冰冻蚀刻结果证明了光合膜蛋白成功地插入脂双分子层中;(2)生化分析证明蛋白脂质体重组过程中蛋白组分没有丢失,脂含量不变;(3)化学交联实验结果证明PSⅡ核心亚基和LHCⅡ亚基之间存在相互作用;(4)重组后PSⅡ核心复合物的放氧活性显著提高,说明膜脂环境有利于维持PSⅡ的光化学活性。 77 K荧光光谱、叶绿素a荧光诱导动力学以及2,6-二氯靛酚钠还原速率等一系列测量结果证明,蛋白脂质体中微量天线的缺失并没有阻断激发能从LHCⅡ向PSⅡ核心复合物的传递,微量天线并不是LHCⅡ向PSⅡ核心复合物激发能传递的必要前提条件。另外,含有微量天线的MCC-LHCⅡ蛋白脂质体的光化学活性整体高于不含微量天线的CC-LHCⅡ蛋白脂质体,说明微量天线有利于维持PSⅡ核心复合物的光化学活性,其原因可能是微量天线的存在稳定PSⅡ核心复合物的结构。
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