干扰热休克蛋白60加重LPS等对离体大鼠胰腺组织的损伤

• 作 者: 李学晋
• 机 构: 同济大学医学院
• 出 处: 同济大学基础医学院 同济大学医学院 同济大学
• 发表日期: 2009年期
• 关键词: 急性胰腺炎 离体胰腺组织 热休克蛋白 RNA干扰 脂多糖 淀粉酶

目的：研究大鼠胰腺组织在热休克蛋白60(HSP60)被干扰后，对脂多糖(LPS)、急性胰腺炎血清(APs)、急性胰腺炎腹水(APa)等损伤因子刺激的反应，以探讨HSP60对胰腺组织的可能的保护作用。　　
方法：分离培养大鼠离体胰腺组织块，用LPS、APs、APa刺激离体胰腺组织块，以NS作为对照，在作用前和作用后1、2、4h时间点测定以下指标：采用碘-淀粉比色法测定上清液中淀粉酶水平；采用ELISA法测定上清液中肿瘤坏死因子(TNF-a)水平；采用MTT法检测胰腺组织的活力；采用Realtime-PCR测定胰腺组织HSP60的表达量。然后用RNA干扰技术抑制离体胰腺组织中HSP60的表达后，再用LPS、APs、APa刺激胰腺组织，同样在1、2、4h时间点测定上述指标的变化。　　
结果：LPS、APs、APa刺激离体胰腺组织后1h，胰腺组织的活力与对照组比较稍有降低，上清液中淀粉酶水平、上清液中TNF-a水平、离体胰腺组织HSP60的表达量比对照组有所增高，但差异均无统计学意义；在刺激后2h、4h，离体胰腺组织的活力、胰腺组织HSP60的表达量明显降低(P<0.05)，培养上清液中淀粉酶和TNF-a水平与对照组比较明显增高(P<0.05)。RNA干扰离体胰腺组织的HSP60后，用LPS、APs、APa刺激胰腺组织，与对照组及HSP60未干扰组比较，刺激后1h胰腺组织HSP60的表达量降低(P<0.05)，胰腺组织的活力降低(P<0.05)，上清液中淀粉酶和TNF-a水平均明显增高(P<0.05)；在刺激后2、4h，胰腺组织HSP60的表达量持续降低(P<0.05)，胰腺组织活力降低(P<0.05)，上清液中淀粉酶和TNF-a水平更加升高(P<0.05)。　　
结论：LPS、APs、APa对离体胰腺组织具有损伤作用，并呈时间依赖性；RNA干扰抑制离体胰腺组织HSP60的表达后，LPS、APs、APa更容易导致离体胰腺组织损伤，且损伤程度更加严重；表明HSP60对胰腺组织具有保护作用。