MhGAI2基因在番茄中的异位表达分析

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赤霉素(gibberellic acid,GA)调控植物生长发育的各个方面,包括种子萌发、下胚轴伸长、叶片生长和开花等。DELLA蛋白的N端具有高度保守的DELLA结构域,该结构域在GA信号诱导的DELLA蛋白降解过程中起关键作用。若DELLA结构域或上下游的重要氨基酸序列发生改变,DELLA蛋白就不能响应GA信号发生降解,表现为对GA信号不敏感,从而抑制植物生长发育。从平邑甜茶中扩增了DELLA蛋白编码基因MhGAI2,通过搭桥PCR对其DELLA结构域编码序列进行定点突变,获得MhGAI2的GA不敏感型等位基因ΔMhGAI2。用ΔMhGAI2基因遗传转化番茄,获得ΔMhGAI2基因异位表达的转基因番茄,转基因番茄TH和TL株系作为ΔMhGAI2在番茄中的高表达和低表达株系,由于TH和TL的纯合体后代表现对GA极不敏感以及致矮现象严重,因此试验中我们选择的都是半矮化的杂合体研究ΔMhGA2对生长发育的抑制作用。同时,转pBI121空载体的番茄为对照,命名为pBI。表型观察发现,转基因番茄植株矮化,下胚轴、主枝和侧枝节间长度等变短,且表现为GA不敏感。另外,与对照相比,转基因番茄株系的花序更紧凑,花、果实和种子等也都比对照小。干旱逆境处理后,转基因番茄幼苗的抗旱能力明显强于对照。
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