结核持留菌体外模型的建立及苓部丹抗结核持留菌作用的研究

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结核病(TB)是仅次于艾滋病的第二大致死性传染病。1993年世界卫生组织(WHO)宣布“全球结核病处于紧急状态”,并把结核病列为重点控制的传染病之一。1998年WHO再一次指出“遏制结核病行动刻不容缓”。近年来由于耐药、耐多药、泛耐药结核病及与艾滋病合并感染等因素的存在使得结核病的控制愈加困难。   结核菌持留状态(persistence)或称持留菌(persister)是导致结核病病程迁延、复发的重要原因,严重影响结核化疗的疗程,成为结核病化疗的瓶颈之一。因此目前迫切需要研发新型针对结核分枝杆菌持留状态有杀灭作用的药物。此类药物的研制对缩短结核病的疗程,降低耐多药结核病的发生,减少结核病的复发和患者的再感染几率有着极为重要的意义。   本研究在复方芩部丹对临床难治性肺结核具有很好疗效基础上,探讨其对难治性肺结核有疗效是否为针对结核菌持留状态起作用。为此,本研究以结核无毒株H37Ra为研究对象,采用低氧诱导的方式建立结核持留菌体外模型。通过SDS-PAGE电泳观察细菌Acr蛋白的表达情况及电镜形态学观察,发现H37Ra在低氧诱导≥7天时,细菌Acr蛋白表达明显增加,且电镜下观察到细胞壁增厚。结合两者结果证实结核持留菌体外模型建立成功。进而通过这一体外模型考察芩部丹含药血清及部分单体对Acr形成的影响,以此评价各药物对结核持留菌形成是否存在抑制作用。结果表明,黄芩苷、黄芩素及对叶百部碱对结核持留菌的形成有较明显抑制作用。   本研究所建立的结核持留菌体外模型及基于此模型对药物的评价为下一步对黄芩苷、黄芩素及对叶百部碱作用机理的深入研究提供了依据,为今后筛选对结核持留菌有效的中药单体及复方中药提供可靠方法,也为今后深入研究中药的药物作用机制提供参考。
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