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目的
1、超声内镜引导下将缓释吉西他滨植入猪的胰腺中,观察胰腺组织的损伤和细胞凋亡的程度。
2、探寻组织间化疗在猪的胰腺是安全和可行的。
3、通过本项目证实内镜超声引导下植入缓释吉西他滨进行组织间化疗是一种安全有效的化疗方式。
4、本项目研究是要建立一种内镜超声引导下组织间化疗的方法,将有可能为广大进展期胰腺癌患者提供一个崭新的治疗方法,以缓解病情、延长患者的生命,提高生活质量。
方法
健康家猪4只,在内镜超声引导下将19G穿刺针刺入猪的胰腺组织中,通过穿刺针将能够缓慢释放吉西他滨的化疗粒子1粒植入至胰腺组织的特定位置,在操作前后抽血,查血常规,血淀粉酶及肝功能。
观察14天后,注意有无食欲不振、易怒等症状。抽血验以上数值。在内镜超声下观察胰腺组织。
处死动物后,剖腹检查以排除腹腔出血、胰瘘、腹膜炎等并发症。
取出放置粒子部位的胰腺组织进行观察。距植入点每间隔10mm取材一次,共5次,对组织标本冰冻保存。
对组织标本进行HE染色,在光镜下观察组织损伤的程度,计算变性坏死区的面积。应用免疫组化技术,用原位细胞凋亡检测(TUNEL)试剂盒,对组织标本的凋亡进行免疫组化检测和量化分析。
结果
4只家猪都能耐受此实验。在14天的化疗观察期,家猪并没有食欲或者情绪的变化。血液生化指标(红细胞,白细胞,血小板,ALT,血清淀粉酶)的变化不显著(P＞0.1)。
在内镜超声下观察胰腺组织,所有化疗粒子均可找到。将猪处死后取出胰腺组织,化疗粒子周围的胰腺组织呈白色,化疗粒子无移位,所有粒子均可找到。
病理组织学检查证实在化疗粒子周围出现纤维素性坏死,在坏死组织与非坏死组织之间界线清晰。在坏死区域周围仅有轻微炎症出现。放置化疗粒子周围2cm以外的胰腺组织以及周围器官是正常的。在病灶中心1cm范围的组织内出现了数量众多的凋亡细胞。在距病灶中心5cm处,几乎找不到凋亡细胞。
结论
1、论证经内镜超声引导下经消化道胰腺穿刺局部给药进行胰腺组织间化疗是一种安全、有效的、可重复的给药方式。
2、内镜超声引导下植入缓释吉西他滨用于胰腺的组织间化疗不仅安全、耐受性好,而且可使组织消融、诱导细胞凋亡。