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碳酸酐酶4(Carbonic Anhydrase4，CA4)是碳酸酐酶家族成员之一，催化二氧化碳与水反应生成碳酸氢根与氢离子的可逆反应，主要影响细胞环境中的pH值。目前，基于CA4的研究主要集中在肺、骨骼肌和癌症中，对生殖发育方面的研究较少。研究表明，CA4在鸡贮精腺上皮细胞中有表达，并且在子宫阴道交接部表达量高，提示CA4对雌性家禽贮精腺酸碱环境具有调控作用。 本研究以鸡胚成纤维细胞(DF-1)为模型，利用RNAi方法，通过细胞培养、免疫荧光、免疫组化、qRT-PCR等技术研究CA4对DF-1细胞培养液pH和左旋乳酸的作用。主要研究结果如下: (1)筛查鸡CA4基因外显子区段上存在的SNP位点，发现6个SNP位点，其中有4个SNP的密码子变化引起了氨基酸的变化。第620位碱基发生C/T突变，该位点突变引起脯氨酸突变为亮氨酸，第721位碱基发生T/A突变，该位点突变使色氨酸突变为精氨酸，第796位碱基发生A/T突变，该位点突变导致编码的赖氨酸突变为终止密码子，第847位碱基发生G/T突变，该位点突变导致编码的甘氨酸突变为半胱氨酸。 (2)CA4和MCT4基因均在DF-1细胞表达，定位于细胞膜，因此DF-1细胞可以用于研究CA4基因的功能。 (3)在CA4基因表达量降低后，细胞培养液pH值下降，而DF-1细胞培养液中的左旋乳酸含量显著降低(p＜0.05)。