【摘 要】
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MHC I类分子链相关基因A(MICA),是非经典的HLA I类基因.它是MIC家族(MICA-MICG)的成员.在这个家族的7个基因中仅有MICA和MICB可以转录出mRNA,分别表达出MICA和MICB蛋白.MICA
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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MHC I类分子链相关基因A(MICA),是非经典的HLA I类基因.它是MIC家族(MICA-MICG)的成员.在这个家族的7个基因中仅有MICA和MICB可以转录出mRNA,分别表达出MICA和MICB蛋白.MICA是具有杀伤活性细胞的一个新配体.表达在大部分的NK细胞、CD8<+>α β T细胞和γ δ T细胞表面的NKG2D是已发现的一个MICA受体.MICA蛋白可在多种肿瘤细胞表面表达,如肺癌、乳腺癌、卵巢癌、头颈部肿瘤、子宫癌、肾癌、结肠癌等.研究表明随着肿瘤生长而脱落的MIC分子可导致肿瘤的免疫逃逸.因此,本研究初步尝试确定人血清MICA及MICA抗体含量的正常范围,以期建立上皮性肿瘤非创伤检验的新方法.并且通过分析MICA单抗CDR3区序列组成、筛选MICA抗原表位、表达MICA配体NKG2D,为本室的后续工作做出准备.本论文的主要研究内容所用的方法及结果如下:1.ELISA法检测人血清MICA及其抗体含量方法:用ELISA法检测正常人及肿瘤患者血清MICA蛋白及抗体水平.通过上述实验研究,得到的初步结论是:1.初步确定了人血清MICA蛋白及抗体的检测方法;确定了人血清MICA蛋白及抗体含量的正常范围;观察到肿瘤病人血清MICA蛋白及抗体含量均较正常人升高;并发现人血清MICA抗体水平与血清糖蛋白CA242水平呈负相关.2.小鼠抗人MICA单抗CDR3区呈现长度多态性;重链CDR3区两端相对保守,中间高度可变.3.用噬菌体十二肽库筛选到一个MICA可能的构型抗原表位NHDL.4.完成了NKG2D的原核表达载体的构建,表达并纯化了重组NKG2D蛋白.初步功能实验证实重组NKG2D蛋白在体外能与重组MICA结合.
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