异甘草素对人宫颈癌细胞增殖的抑制作用

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异甘草素(isoliquiritigenin,ISL)是从天然甘草中提取的一种黄酮类化合物,具有抗肿瘤、抗病毒、抗自由基、抑制脂质过氧化等生物活性,其中抗肿瘤作用是近年来的研究热点。本课题分以下两个方面:(1)因为ISL几乎不溶于水,其应用受到一定的限制,而脂质体剂型可以增加难溶性药物的水溶性,改变被包封药物的体内分布,所以本课题采用超声波薄膜分散法制备了ISL脂质体,观察该脂质体对人宫颈癌细胞体外增殖的抑制作用;(2)有研究发现ISL对不同的细胞系作用不同,且作用机理还不甚明确,因此,本课题采用对ISL很敏感的人宫颈癌细胞系(CaSki)研究了ISL对肿瘤细胞体内外增殖的抑制作用及可能机制。 采用超声波薄膜分散法制备ISL脂质体,正交设计优选制备工艺;透射电镜观察形态;激光粒径仪测定平均粒径;葡聚糖凝胶层析法分离含药脂质体与游离药物并测定包封率;离心加速实验考察脂质体的稳定性;活细胞计数法测定生长曲线;MTT法测定细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析细胞周期因子cyclinB1表达;建立人宮颈癌CaSki细胞裸鼠移植瘤模型观察抑瘤率。 研究结果显示:(1)ISL脂质体的平均粒径为233.1 nm,跨距为0.74,平均包封率为82.57%,稳定性良好;ISL脂质体(5~80μmol·L-1)浓度依赖性地抑制宫颈癌HeLa和SiHa细胞增殖,并呈时间依赖性,于d3达高峰,其抑制率分别为83.44%和96.14%;浓度依赖性(5~80μmol·L-1)抑制HeLa和SiHa细胞增殖,IC50分别为34.24和29.82μmol·L-1(ISL的IC50分别为75.39和69.33μmol·L-1);(2) ISL浓度依赖性(10~80μmol·L-1)抑制CaSki细胞增殖,IC50为19.33μmol·L-1,且呈时间依赖性,ISL 20μmol·L-1作用3d抑制率为82.26%;ISL浓度依赖性(10~80μmol·L-1)降低CaSki细胞G0/G1期细胞比例,增加S和G2/M期细胞比例;cyclinB1表达显著下降;ISL(20~500 mg·kg-1·d-1)剂量依赖性抑制CaSki细胞裸鼠皮下移植瘤的生长,抑瘤率分别为36.8%,51.2%和84.6%。
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