益气养阴活血方对糖尿病大鼠大血管血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达的影响

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目的:本实验通过建立糖尿病大鼠模型,应用益气养阴活血方对糖尿病大鼠进行干预治疗,观察该药对糖尿病大鼠血糖、血脂、大血管内皮组织形态和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达的影响,研究本方对糖尿病大鼠大血管病变的防治作用及可能机制。  方法:选清洁级雄性SD大鼠46只,160g~180g,普通饲料适应性喂养一周后,随机分出10只为正常(N)组,参照相关文献,除正常组外,其他均给予1%的链脲佐菌素(STZ)枸橼酸缓冲液(枸橼酸缓冲液为0.1mmol/L,pH4.5)60mg/kg体重单次腹腔注射,正常组给予相应的1%柠檬酸.柠檬酸钠溶液注射。72h后尾静脉采血,测定血糖浓度≥16.7mmol/L,大鼠尿量及饮水量明显增多,则造模成功。成模的大鼠随机分为模型对照(M)组、益气养阴活血方(Z)组(中药组)、辛伐他汀(X)组(西药组),每组12只,然后除模型对照组外的成模大鼠按成人剂量的10倍灌胃,Z组和X组每日一次,Z组按31g/kg·d灌胃,X药组给予辛伐他汀片每日1.7mg/kg·d灌胃,N组与M组每日给予相应体积的生理盐水灌胃。共灌胃12周。于末次灌胃后禁食禁水12h,2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后股动脉取血,分离血清检测葡萄糖、胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白。无菌操作取胸主动脉置于10%的福尔马林溶液中,常规固定,石蜡包埋切片备用,用于光镜下观察大血管内皮组织形态学变化,免疫组化法测定大血管血管细胞黏附分子1(VCAM-1)的表达情况。  结果:⑴正常组大鼠在实验中精神、饮食、饮水、尿量、行为活动均正常。模型组大鼠则精神萎靡,明显多饮、多食、多尿、消瘦、毛色枯黄、倦怠嗜卧,反应迟钝等情况。有些大鼠出现轻度半身不遂,双下肢水肿等症状。中药组大鼠异常表现较模型组为轻。⑵造模后糖尿病各组大鼠血糖增高,与正常组比较,差别有统计学意义(P<0.01);西药组与模型组之间比较血糖变化不明显,无统计学意义(P>0.05).中药组与模型组相比血糖明显下降,差别有统计学意义(P<0.01)。与正常组比较,模型组及各治疗组体重明显下降,有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,中药组体重增加明显,差别有统计学意义(P<0.01);西药组与模型组之间比较,体重无明显增加(P>0.05)。⑶模型组及各中药组的胆固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL)及西药组的胆固醇(TC)都明显高于正常组(P<0.01);各治疗组与模型组相比,血浆总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL)水平明显降低,差别有统计学意义(P<0.01);西药组血浆TC和LDL比中药组低,差别有统计学意义(P<0.01)。⑷正常组细胞的纹理清晰,走形正常,胞浆的着色均匀,动脉的内皮细胞扁平,内膜平坦,中膜的平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)与弹力板近似平行相间排列。模型组的大鼠胸主动脉壁出现局限性的内膜增厚,内皮细胞突起,中膜浅层的平滑肌细胞(SMC)可见增生、排列紊乱,病灶处的弹力板呈不规则波浪状排列,偶见断裂分离现象。中药组的组织形态变化比模型组明显减轻。⑸与正常组比较,模型组及各治疗组大鼠胸主动脉血管细胞黏附分子1(VCAM-1)的表达明显高升高(P<0.01)。中药组与模型组比较,VCAM-1表达明显减轻(P<0.05),差别有统计学意义。两个治疗组比较,中药组VCAM-1表达减轻,差别有统计学意义(P<0.05)。  结论:①益气养阴活血方能够改善糖尿病大鼠的一般状态,降低血糖、血脂,调节糖、脂代谢。②益气养阴活血方可以改善糖尿病大鼠大血管内皮组织的病理形态,起到保护大血管内皮的作用,从而能够为临床应用提供一种可能的治疗方案。③益气养阴活血方对大血管病变的防治作用可能与其降低血糖,改善脂代谢,抑制血管细胞黏附分子1(VCAM-1)的表达有关。
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