三种相思的组织培养技术研究

来源 :中国林业科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xzw333
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本论文对卷荚相思(Acacia cincinnata)、厚荚相思(Acacia crassicarpa)和黒木相思(Acacia melanoxylon)的组织培养技术进行了系统研究,主要内容包括:3种相思外植体消毒、初代培养、增殖培养、生根培养和移栽技术等,成功建立3种相思丛生芽诱导途径的组培快繁技术,为相思类树种优良无性系的快速繁殖奠定了基础。此外,还着重研究了卷荚相思外植体的消毒技术,解决了卷荚相思外植体污染率高和采集困难等问题;研究了厚荚相思多次继代培养和瓶外生根技术,提高了厚荚相思优良无性系工厂化组培生产的效率;建立了一套完善的黒木相思离体再生技术体系,为黑木相思的遗传改良提供了技术支持。主要试验结果如下:(1)卷荚相思组培快繁体系将卷荚相思优良单株ACN12001的当年新生枝条进行扦插繁殖并建立采穗圃,以采穗圃当年生枝条的带腋芽茎段为外植体,75%的酒精和0.1%的升汞分别处理30s和15min,接入MS+蔗糖20g·L-1上进行初代培养,其存活率为69.33%,芽诱导率86.67%;卷荚相思以改良MS+蔗糖30g·L-1为最佳初代培养基,出芽率可达82.22%;最佳增殖培养基为MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+蔗糖30g·L-1,35d增殖倍数可达3.50;最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.25mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+蔗糖30g·L-1,15d生根率为96.11%;将生根苗移栽至以沙为基质的营养杯中,存活率为71.11%。(2)厚荚相思组培快繁体系以厚荚相思优良单株ACC12001的当年新生枝条的带腋芽茎段为外植体,经75%的酒精和0.1%的升汞分别处理30s和12min后,接入MS+蔗糖20g·L-1进行初代培养,存活率为67.33%,芽诱导率为80.56%;最佳增殖培养基为改良MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.25mg·L-1+Ac0.1g·L-1+蔗糖30g·L-1,35d增殖倍数可达3.72;最佳生根培养基为改良MS+IBA0.5mg·L-1+蔗糖20g·L-1,15d生根率为98.83%;生根苗移栽至以黄心土为基质的营养杯中,存活率为95.83%;瓶外生根以用NAA400mg·L-1浸泡2h后移栽至黄心土效果最好,存活率为73.33%以上。(3)黒木相思组培快繁体系以黒木相思优良单株AMN12001的当年新生枝条的带腋芽茎段为外植体,75%的酒精和0.1%的升汞分别处理30s和12min后,接入MS+蔗糖20g·L-1上进行初代培养,其存活率为80.5%,芽诱导率为55.5%;将初代培养获得的腋芽接入MS+IAA0.5mg·L-1+IBA0.5mg·L-1+蔗糖30g·L-1上,20d后有98.41%的植株生根;若培养40d,生根植株可形成从生芽,其腋芽增殖倍数为2.06,单株繁殖系数为6.18,此过程无愈伤组织形成,将生根苗移栽至以黄心土:沙=2:1的营养杯中,存活率为93.33%。以黑木相思优良单株AMN12002经初代培养获得的无菌芽的叶片、叶柄和茎段为试验材料进行愈伤组织诱导,诱导黒木相思愈伤组织的最佳外植体为茎段;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.5mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+蔗糖30g·L-1,诱导率为93.33%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+蔗糖30g·L-1,分化率为79.17%、再生系数为9.58;再生植株最佳的生根培养基为MS+IBA0.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+蔗糖40g·L-1,15d生根率为96.05%,将黒木相思生根苗移栽至以黄心土:沙=2:1的营养杯中,存活率为93.33%。
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