λ310转基因青鳉检测化合物的致突变效应方法的建立及其应用研究

来源 :温州医学院 温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mujun246
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随着人类活动的进一步加大,社会的逐渐进步,环境中的化合物逐渐增多,越来越严重的威胁到人类的健康。尤其是近年来的一系列检测表明人类的生存环境在进一步恶化,人类的健康处在危险中,但是相关的检测化合物突变效应的结果很少,简便的检测方法也不多,大部分人还没有意识到危险。随着人类研究的不断深入,越来越多的证据表明,环境中存在的污染物可以导致人类基因的突变,并最终导致各种癌症的发生。   本文以转基因青鳉鱼为实验材料,在实验室建立的条件下,利用CⅡ检测方法来衡量化合物的突变效应,并通过优化部分实验方法,使实验结果稳定。我们检测转基因青鳉小鱼和成鱼肝脏组织的自发突变率分别为1.9士0.36(×10-5)和3.5士0.62(×10-5)。用ENU处理转基因的青鳉1h来检验CⅡ检测方法,结果表明,和其他文献报道的结果一致,说明该实验方法在实验室成功建立。   全氟辛烷磺酸(Perfluorooctanesulphonicacid,PFOS)具有难降解性和沿食物链在生物体内富集作用,已经成为一种新型的持久性有机环境污染物,严重危害人类健康与自然环境,己增列入《斯德哥尔摩公约》。国内外对PFOS的毒理学研究已经开展起来,PFOS在鱼体内中易吸收确难消除,其具有脂质过氧化、内分泌紊乱、肝脏毒性、心血管毒性、免疫毒性、生殖发育和潜在的神经毒性,但是对于PFOS是否具有是否能够引起基因突变还没有明确的结论。   为研究PFOS是否能够引起基因突变效应,以浓度为0、9.8、257.0μg/LPFOS静止连续暴毒转基因青鳉30天,30天后用CⅡ检测方法来检测其致突变效应。结果表明,对照组的突变频率为4.25士0.34(×10-5),9.8μg/L和257.0μg/L,组的突变频率分别为6.05士0.46(×10-5),6.25士0.33(×10-5),p=0.0092<0.01),相比于对照组,处理组突变率分别增加了1.42和1.47倍,差别有统计学意义。通过分析突变体的序列发现对照组的突变类型最多的是颠换53%,主要是G:C-+T:A和G:C-+C:G,其次是转换32%,以G:C→A:T为主(73%),移码突变只有15%,插入和缺失几乎相同;9.8μg/LPFOS处理组的突变类型中转换和颠换的比例几乎差不多,其中A:T-+G:C转换明显高于对照组,G:C-+C:G颠换明显低于对照组,其它突变类型差别不大,和对照组相比没有统计学意义的差别;257μg/LPFOS处理组的颠换比例下降为41%,转换和对照组差不多,移码突变的比例上升至23%,其中有78%是+1插入突变,无论是对照组还是处理组所有的插入和缺失的碱基都是G。虽然有报道指出PFOS可能没有致突变效应,但是我们的结果表明PFOS具有一定的致突变效应,而且有明确的突变图谱。
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