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[目的]
探讨异丙酚对内毒素诱导人单核细胞系THP-1细胞TREM-1表达的影响及其可能机制。
[方法]
培养THP-1细胞，分6组，每组中加入不同剂量的LPS(0ng/ml、1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml、10000ng/ml)作用16小时后，收集细胞采用FACS检测TREM-1蛋白水平。以LPS剂量为横坐标，以TREM-1蛋白表达水平为纵坐标绘制剂量-效应曲线，确定实验的LPS刺激剂量。培养THP-1细胞，分成7组，分别对应：Control组，单纯无血清培养基培养；LPS组，单纯LPS刺激；Pro组，单纯加入异丙酚100μM/L；P1组，LPS+异丙酚12.5μM/L；P2组，LPS+异丙酚25μM/L：P3组，LPS+异丙酚50μM/L；P4组，LPS+异丙酚100μM/L。观察规定的时间后收集细胞培养上清液-70℃保存，采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked mmunosorbent assays，ELISA)测定上清液中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)浓度；收集细胞采用流式细胞分类术(fluorescence-activated cell sorting，FACS)检测TREM-1蛋白表达水平；收集细胞采用实时定量PCR(real time quantitative polymerase chain reaction，qRT-PCR)检测TREM-1 mRNA表达水平。
[结果]
1.TREM-1蛋白表达水平在LPS0ng/ml、1ng/ml、10ng/ml剂量时差异无统计学意义(P>0.05)，在100ng/ml后的剂量各组间差异有统计学意义(P<0.05)，同时参考文献后，确定以100ng/ml作为LPS的实验刺激剂量。
2.与LPS组相比，异丙酚与LPS共孵育处理下，P1组与P2组的细胞表面TREM-1蛋白表达水平无明显差异(P>0.05)；P3组与P4组的细胞表面TREM-1水平则明显增高(P<0.05)，而且P4组优于P3组(P<0.05)。
3.在不同浓度异丙酚与LPS共孵育下，与LPS组相比较，在P1组与P2中TNF-α水平下降不明显(P>0.05)，但随着培养液中的异丙酚浓度升高而呈下降趋势，P3组与P4组细胞上清液中TNF-α水平明显下降(P<0.05)。
4.与Control组比较，LPS组TREM-1 mRNA含量明显增加(P<0.05)。LPS组、P1组、P2组、P3组中TREM-1 mRNA含量均无明显差异(P>0.05)；P4组与LPS组比较，细胞TREM-1 mRNA的表达水平差异有统计学意义(P<0.05)，比P1、P2、P3各组的TREM-1 mRNA含量均有明显降低(P<0.05)。
5.异丙酚浓度与细胞表面TREM-1蛋白水平呈显著正相关r=0.8877(P<0.01)，异丙酚浓度与培养上清液中的TNF-α水平及细胞TREM-1 mRNA表达水平呈显著的负相关，相关系数分别是r=-0.8585(P<0.01)，r=-0.8139(P<0.01)；细胞表面TREM-1蛋白水平与细胞培养上清液中的TNF-α浓度及细胞TREM-1mRNA水平呈显著的负相关，相关系数分别是r=-0.7868(P<0.01)，r=-0.8232(P<0.01)。
[结论]
1.人单核细胞系THP-1细胞表面TREM-1表达水平较高，随着LPS剂量的增加呈下调趋势；细胞表面TREM-1水平与上清液中TNF-α浓度呈负相关关系，与细胞TREM-1 mRNA水平呈负相关关系。
2.异丙酚呈剂量依赖性地增加人单核细胞系THP-1细胞表面TREM-1表达水平，两者呈正相关关系；小剂量异丙酚可抑制细胞炎性反应，减少TNF-α的释放；异丙酚可抑制人单核细胞系THP-1细胞TREM-1 mRNA的表达。