【摘 要】
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近年来，在生物体内发现一类新型非编码小RNA，即piRNA，其与Argonaute蛋白家族中的PIWI蛋白成员结合发挥沉默转座子、调控基因表达、对抗病毒感染等作用。在秀丽隐杆线虫生殖系统中，piRNA能够识别外源基因并且将外源基因沉默，然而在线虫生殖系统还有很多内源基因也是潜在的 piRNA靶基因，这些基因能正常表达不被piRNA沉默，因此必然存在一个机制使piRNA可以选择性沉默不同的靶基因。目
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近年来，在生物体内发现一类新型非编码小RNA，即piRNA，其与Argonaute蛋白家族中的PIWI蛋白成员结合发挥沉默转座子、调控基因表达、对抗病毒感染等作用。在秀丽隐杆线虫生殖系统中，piRNA能够识别外源基因并且将外源基因沉默，然而在线虫生殖系统还有很多内源基因也是潜在的 piRNA靶基因，这些基因能正常表达不被piRNA沉默，因此必然存在一个机制使piRNA可以选择性沉默不同的靶基因。目前对于 piRNA 的相关研究仍然处于起步阶段，piRNA如何识别不同来源的靶基因、piRNA介导基因沉默的机制以及piRNA是否有其他的生物学功能等，这些问题都有待阐明，因此对 piRNA的功能和作用机制进行系统性研究是非常必要的。
近年来RNAi技术发展迅速，其可以利用siRNAs特异和高效地沉默目的基因，已经成为研究基因功能的重要手段而被广泛应用。由于秀丽隐杆线虫全基因组RNAi文库已建立，我们运用CRISPR/Cas9技术构建针对内源基因oma-1的特定piRNA报告线虫株系，oma-1 targeting piRNA; oma-1ts，利用该株系的温度敏感型致死表型，以此piRNA报告线虫株系为基础，通过线虫全基因组RNAi筛选，寻找piRNA通路相关功能基因。我们共筛选到4个相关候选基因，分别是cdc-26、mus-101、such-1和F44B9.8。其中有两个基因cdc-26和such-1都与APC/C复合体有关联，还有2个基因mus-101和F44B9.8都具有核酸结合活性，接下来通过对这些候选基因和APC/C复合体的深入研究，将有助于阐明piRNA通路的功能和作用机制，也有望加深对piRNA功能的理解。
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