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华支睾吸虫病是一种严重危害人类健康的食源性寄生虫病，主要分布于东南亚地区和我国大部分省市。早期诊断极其重要，目前应用较多的主要为免疫学方法。华支睾吸虫病免疫学诊断包括循环抗原和特异性抗体的检测，特异性抗体检测在华支睾吸虫病诊断中应用广泛，但抗体在治疗后仍可存在，不能区分现症感染和既往感染；而循环抗原是活虫存在的依据，因此，利用免疫学新技术开发敏感性高、特异性强、适合现场应用的检测华支睾吸虫循环抗原的方法是防治工作的重点。 本研究首先制备了华支睾吸虫重组半胱氨酸蛋白酶(rCsCp)，以该重组蛋白免疫母鸡，使用试剂盒提取和纯化抗rCsCp的鸡卵黄免疫球蛋白（IgY），并对纯化后的IgY进行鉴定，制备得到分子量为270kDa的特异性抗rCsCp的IgY多克隆抗体（anti-rCsCp IgY）。将anti-rCsCp IgY耦联在纳米磁珠上，以辣根过氧化物酶（HRP）标记的兔抗rCsCP多克隆抗体IgG（HRP-IgG）作为检测抗体，建立了基于IgY的免疫磁珠夹心ELISA（IgY-IMB-ELISA）法，此法最低可检测出7.8ng/ml的rCsCP。 用此方法检测华支睾吸虫感染病人血清中循环抗原，结果显示，用IgY-IMB-ELISA法检测重度感染组（每克粪便虫卵数5000-9999）、中度感染组（每克粪便虫卵数1000-4999）和轻度感染组患者（每克粪便虫卵数1-999），其检出率分别是93.33％（14/15）、86.67％（13/15）和75％（9/12），检出率与粪便中虫卵数成正相关（相关系数0.83）。与正常人（0/20）、猪囊尾蚴病人（0/10）和旋毛虫病人（0/10）血清无反应；与慢性日本血吸虫病人及肺吸虫病人的交叉反应率分别为6.67％（2/30）和10％（3/30）。IgY-IMB-ELISA法检测华支睾吸虫病人的特异性为95％。因此，IgY-IMB-ELISA法可有效地检测出华支睾吸虫患者血清中循环抗原，与其他常见寄生虫病的交叉反应性较低，提示基于IgY的免疫磁珠ELISA法是一种敏感性好、特异性高的检测华支睾吸虫循环抗原的新方法。