论文部分内容阅读
大肠杆菌病的发生和流行严重威胁水貂养殖业的健康发展。目前大肠杆菌病在水貂养殖业中普遍存在,为了防治水貂大肠杆菌病,抗菌药物被长期、广泛的不合理使用,导致了大肠杆菌耐药菌株不断出现,给该类疾病的防控带来诸多困难。另外,动物源耐药菌所携带的耐药基因可以转移至其他物种的病原菌,对人和其他物种的健康也构成潜在威胁。为了初步探究山东省貂源大肠杆菌的流行血清型、耐药情况、致病性等,本论文开展了以下相关研究,对山东省荣成、文登、诸城等地2010~2014年病死貂病料进行细菌分离纯化和生化试验鉴定;对分离到的大肠杆菌进行O抗原血清型鉴定;根据药敏试验结果对大肠杆菌的耐药基因进行了检测,此外,还对分离得到的大肠杆菌进行了水貂回归试验,进一步了解大肠杆菌的致病特性。试验结果如下:分离得到的27株大肠杆菌中,血清型包括O88(7株)、O114(3株)、O78(2株)、O167(2株)、O18(3株)、O20(2株)、O15(4株),O10、O35、O91、O92各1株,其中以大肠杆菌O88为主要流行的血清型,占本次检出全部血清型的25.9%。通过药敏试验发现致病菌对头孢类、喹诺酮类、甚至多粘菌素等多种药物产生耐药性。经过耐药基因检测,发现分离菌不同程度携带耐药基因,其中TEM检出5株(18.5%),CFR检出1株(3.7%),qnr A检出5株(18.5%),oqxA检出11株(40.7%),tetA检出12株(44.4%),gyr A检出10株(37%)。在27株定型菌种中,携带1种耐药基因的检出6株(22.2%),携带3种耐药基因的检出4株(14.8%),携带4种耐药基因的检出4株(14.8%),携带5种耐药基因的检出5株(18.5%)。另外,对分离得到的27株致病性大肠杆菌分别进行了回归试验,27组实验组水貂在接种分离菌后3~5d内,均出现腹泻、剧烈下痢等症状。取病死水貂脑组织接种于麦康凯琼脂培养基37℃培养12h,有红色菌落生长,革兰氏染色后镜检符合大肠杆菌特征,生化试验鉴定显示分离菌为大肠杆菌,而对照组5只水貂全部存活,说明这27株分离菌均为致病性大肠杆菌。以上结果说明,我省貂源致病性大肠杆菌血清型较为复杂多样,耐药性严重且存在交叉耐药现象,并具有较强的致病性。本研究为山东省水貂大肠杆菌病的防治和合理用药提供了理论依据。