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金线莲(Anoectochilus roxburghii)属于兰科(Orchidaceae)开唇兰属的多年生草本植物,全世界约有40种,分布于亚洲热带和亚热带地区及太平洋,如中国、日本、斯里兰卡、新喀里多尼亚、美国的夏威夷、印度和尼泊尔等国。金线莲不仅仅叶型美观,具有观赏价值,且全草均可入药,有清凉解毒、滋阴降火、消炎止痛之功效。在民间(尤其是台湾)金线莲常被用于治疗急慢性肝炎、急慢性肾炎、肾衰竭、青春痘、大小便出血、心脏无力、高血压、高血脂、糖尿病、妇科疾病、癌症等疾病。由于其有如此广泛的用途,因此有“药王”之称。金线莲对生态环境要求苛刻,生长和自然繁殖缓慢,其种子微小,在自然条件下难以萌发,近些年来由于人为地过度采挖,金线莲已经接近濒危状态。因此,利用组织培养技术对金线莲进行繁殖,有利于其种质资源的保存和产业化发展。同时由于金线莲抗病弱,在栽培过程中需要频繁使用农药来控制病害,故生产出来的产品质量不一,存在激素残留或农药残留的危害。为了保证生产出来的金线莲能够作为安全的药材和保健食品原材料,开发出少含激素、无公害的特别适合金线莲生长的培养基配方,具有广阔的工厂化生产应用前景。
本研究以金线莲的2个不同品系的茎节为外植体,比较了不同培养基成分对金线莲生长的影响。培养基成分实验设定包括不同浓度的蔗糖、MS大量元素、蛋白胨、凝固剂和酸碱度、活性炭及各种有机天然添加物。研究结果表明,在以MS为基本培养基的情况下,经过1个月、2个月、3个月和5个月的培养,不同蔗糖浓度对Z材料的组织培养结果显示,4.0%蔗糖浓度培养的Z材料其净增重和干重值均最大,材料的干重/鲜重比值随着蔗糖浓度的升高而呈递增趋势。以不同MS大量元素处理材料时,1.1MS大量元素对Z材料的增重效果最好,其干重也达最大值,随着MS大量元素浓度的升高其干重/鲜重的比值呈递增趋势。以不同蛋白胨浓度处理Z材料时,800mg/L蛋白胨培养的材料其净增重、干重、干重/鲜重值均为最大。以不同pH值和琼脂浓度处理Z材料时,当pH为6.5,琼脂浓度为5000mg/L时,材料的净增重、干重、干重/鲜重值达到最大,且在同一pH值下,高浓度的琼脂比低浓度的琼脂更加有利于材料的生长。以不同活性炭浓度处理Z材料时,2000mg/L活性炭对材料的培养效果最好,而l000mg/L活性炭对材料的培养效果最差。
金线莲在单独添加不同的有机天然添加物的MS基本培养基中的组织培养结果表明,用不同浓度的香蕉浆处理Z材料和S材料时,5%香蕉浆浓度对材料的培养效果最好,20%的香蕉浆浓度处理对材料的培养效果最差。随着香蕉浆浓度的升高,S材料的净增重和干重/鲜重比值均呈递减趋势。以不同浓度的马铃薯浆处理材料时,15%马铃薯浆处理的材料净增重和干重/鲜重均最大,且添加马铃薯浆对材料的培养效果比不添加马铃薯浆的培养效果好。不同椰子汁浓度处理材料时,20%椰子汁浓度对材料的培养效果最好,且添加椰子汁对材料的培养效果比不添加椰子汁的培养效果好。