新型有机硒化合物BBSKE诱导舌鳞癌细胞凋亡的体外研究

• 作 者: 张蕾
• 机 构: 辽宁医学院
• 出 处: 锦州医学院 辽宁医学院
• 发表日期: 2005年期
• 关键词: 有机硒化合物 BBSKE 舌癌细胞 细胞凋亡 舌鳞癌 免疫组化

目的研究新型有机硒化合物BBSKE对人口腔舌鳞癌细胞Tca83的影响。通过体外实验研究不同浓度的新型有机硒化合物BBSKE在不同作用时间对人口腔舌鳞癌细胞Tca83诱导凋亡的程度，以证明新型有机硒化合物BBSKE对舌鳞癌有明显的诱导凋亡作用，从而为体内研究和临床研究提供理论依据。
方法体外培养人舌鳞癌细胞株Tca83，在不同浓度的新型有机硒化合物BBSKE作用不同时间后，采用MTT比色法、流式细胞计数、免疫组化方法和原位杂交法分别检测细胞存活率、细胞凋亡率、bcl-2蛋白表达并计算其阳性表达率，以及检测bcl-2mRNA表达。
结果MTT法检测结果显示，随着BBSKE浓度的加大和作用的时间的延长，细胞凋亡率随之升高。在相同时间内各浓度组均与阴性对照组有显著性差异，且各浓度组之间也有显著性差异(P＜0.05)，说明其诱导人舌鳞癌细胞Tca83细胞凋亡具有浓度依赖性，在同一浓度下，除BBSKE(0.4ug/ml)组24h和48h之间无显著性差异，其余各组在24h，48h，72h之间都具有显著性差异，说明其诱导细胞凋亡有时间依赖性；FCM分析结果显示，随药物浓度和作用时间的增加，细胞凋亡率也随之增多；免疫组化法检测bcl-2蛋白表达，结果显示阴性对照组阳性细胞表达率明显高于实验组，三个BBSKE浓度组之间有显著性差异，阳性细胞表达为胞质呈棕色或棕褐色颗粒状着色，部分细胞胞核也出现棕色染色；通过原位杂交法见阴性对照组细胞阳性表达远远高于实验组，胞质呈棕黄色着色，部分胞核可出现棕色染色。后两种方法证明，新型有机硒化合物BBSKE诱导人舌鳞癌细胞凋亡并与bcl-2有关。
结论体外实验表明，新型有机硒化合物BBSKE能够诱导舌鳞癌细胞凋亡，并且有浓度依赖性和时间依赖性，且其诱导凋亡能力高于相当浓度的DDP组。并且与bcl-2基因有关，随浓度加大和时间延长其阳性表达下降。