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近年来,由于国内食品安全问题频发,使人们已经越来越重视食品的安全。食品安全问题一般分为两种,一是食品添加剂的滥用或非法添加其它化学物质；二是食品原料上的药物残留。食品添加剂在适量的范围内使用是对人有益或者无害的,但一些不法商家为了节约成本将一些非食品添加剂掺假加入到食品中,导致人食用后出现健康问题,如在国内的三聚氰胺恐慌事件。一些食品原料,如禽类,通常在其养殖过程中一般都会使用到兽药和饲料添加剂,兽药或者饲料中的超标药物不可避免的在动物体内的大量残留,并通过食物链对人体健康造成威胁。为了有效地监控食品产品中的非法添加物质和药物残留,筛选出一套可行的药物残留量的检测方法,有着广泛的社会意义。加替沙星是一类光谱抗菌药物,由于其出色的抗菌能力,经常被添加到饲料中,以此来增加家畜的抗病能力,但此药物可以通过食物链进入到人体,影响人们的身体健康。而三聚氰胺原是一种化工原料,但因其含氮量高,价格低廉,常被一些不法商家用作食品添加剂,以造成食品检测中蛋白质高含量的假象,美国多起宠物猫、狗中毒死亡事件以及我国奶制品恐慌事件的发生已经暴露其极大毒害性。目前,许多国家已规定了食物中加替沙星和三聚氰胺的最高检出上限,因此亟需建立方便可靠的加替沙星和三聚氰胺的检测方法。目前主要仪器方法,主要包括液相色谱-质谱／质谱法(LC-MS/MS)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱法(GC-MS)和气相色谱-质谱／质谱法(GC-MS/MS)等方法。该类方法具有特异性好、稳定、准确等优点,但对操作人员要求很高,仪器设备昂贵笨重,样品前处理复杂、需要大量的溶剂,费力、费时、普及难度大,不适合大规模样品的即时检测。免疫检测法主要包括CL-ELISA、EICA、ELISA等,该类方法克服了以上方法的缺点,是一种方便、灵敏、快速的低成本检测方法,同时也满足大量样品的即时检测,具有及广阔的发展前景。对于加替沙星电化学检测研究,其免疫原与包被抗原均采用EDC法制得,并制备了加替沙星多克隆抗体,其抗体用间接竞争电化学酶联免疫分析方法检测,检测结果为：IC50是8.9ng/mL,检测限为0.01ng/mL。该抗体除对环丙沙星和氧氟沙星交叉率较高外,对其他药物交叉率均较小。用此抗体建立了电化学酶联免疫检测方法,测定了加替沙星在猪尿中的添加回收率,回收率在93.72%-117.36之间,变异系数在2.16-13.38之间。在三聚氰胺试剂盒制备的研究中,也采用EDC方法合成免疫原和包被抗原并制得了相应的单克隆抗体,采用直接竞争ELISA方法检测三聚氰胺的抗体,检测结果为：IC50是134.8 ng/mL,检测限为20 ng/mL,该抗体跟其他结构相似的药物交叉率均很小,用此抗体制备了三聚氰胺试剂盒,并对试剂盒进行了稳定性加速破坏试验,同时制备的试剂盒进行了牛奶、奶粉和饲料的添加回收试验,其结果为：牛奶中回收率是73%-94%,批间变异系数为9%-15.4%,奶粉中回收率是53%-73%,批间变异系数为9%-15.3%,饲料回收率是52%-65%,批间变异系数为12.4%-18.3%。总之,通过本课题的研究,成功制备了加替沙星的免疫原和包被抗原,并通过动物免疫得到了相应的抗体,成功建立了加替沙星的电化学免疫检测方法。研究还制备了三聚氰胺免疫抗原和包被抗原以及三聚氰胺单克隆抗体,并成功研制出三聚氰胺试剂盒。这些研究结果为酶联免疫技术的应用提供了可行性依据,为药物检测试剂盒的开发开辟了新道路。