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呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus,RSV)是引起婴幼儿下呼吸道感染的最常见病原体之一,其感染遍及全世界,感染率高。RSV对社会经济和医疗资源都产生重大影响和消耗,但到目前为止,尚无安全、有效的预防和治疗方法。近年来,国内外有关抗病毒中药的研究日益增多,从中筛选有效成分已成为当前有效部位新药开发的一个热点。2004年本课题组曾报道连翘水提液具有明显的体外抑制RSV的作用,本研究在此基础上采用抗呼吸道合胞病毒活性为导向的化学分离方法,以利巴韦林为阳性对照药物,采用细胞培养技术对连翘抗病毒有效部位进行了系统研究。结果如下:
一、以抗呼吸道合胞病毒活性作用为导向,采用化学分离方法:经水提醇沉、大孔吸附树脂柱层析分离精制得到连翘抗RSV有效部位LC-4。
二、该有效部位LC-4的半数中毒浓度(TC50)为25.41μg/mL,半数有效浓度(EC50)为2.11μg/mL,治疗指数(TI)为12.04:在RSV感染细胞2h、4h、6h、8h、10h后给药,LC-4和利巴韦林组CPE程度均低于病毒对照组,差异均有显著性意义(P<0.05),说明在RSV感染2h、4h、6h、8h、10h后给药,LC-4仍具有抑制RSV在Hela细胞内复制的作用。
三、LC-4在Hela细胞中对RSV的预防作用结果表明:LC-4在浓度为31.25μg/mL~1.95μg/mL之间均对RSV存在预防作用,而利巴韦林仅在浓度为48.00μg/mL~17.28μg/mL对RSV存在预防作用。
本研究通过薄层层析(TLC)法还进一步证实,该有效部位不是通常认为的具有抗病毒作用的连翘苷,而且其体外具有明显的抑制RSV的作用,所以对LC-4有待于进一步研究其抗病毒活性成分及作用机制的价值,以期为开发研制防治RSV的新型有效部位中药提供可靠的依据。