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目的研究巨噬细胞抑制因子1(MIC-1)在结直肠癌早期诊断中的价值,并探讨多标志物联合检测应用于结直肠癌诊断的可行性。方法应用自主研制的MIC-1定量检测试剂盒及Roche Cobas601电化学发光免疫分析仪分别检测429例不同临床分期的结直肠癌患者和129例健康人血清样本中的MIC-1、CA19-9、CEA和TPS水平,比较MIC-1水平与其它肿瘤标志物关系,与患者TNM分期的关系,以及在结直肠癌诊断和早期诊断中的价值。结果结直肠癌患者血清中的MIC-1水平显著高于正常对照人群(1045.88±892.67,398.04±263.19,P<0.001)；肿瘤患者血清MIC-1水平随肿瘤侵润深度(T分期)增加而升高(P=0.001),并与淋巴结转移(N分期,P=0.007)和远端转移显著正相关(P<0.001); MIC-1、CEA和TPS三种标志物联合检测早期结直肠癌检测敏感性能达到61.3%,显著高于CEA的检出率(25.6%)。结论MIC-1是结直肠癌尤其是早期结直肠癌有价值的血清肿瘤标志物,MIC-1、CEA和TPS联合检测对于提高结直肠癌的早期诊断水平具有重要的临床意义和价值,有可能应用于结直肠癌癌的人群筛查。目的建立Pro-GRP (31-98)基因原核表达系统,分离和纯化Pro-GRP (31-98)蛋白,并建立和筛选出稳定分泌Pro-GRP (31-98)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,建立血清Pro-GRP (31-98)蛋白片段的ELISA检测方法。方法提取小细胞肺癌患者癌组织总RNA,通过逆转录及PCR提取出Pro-GRP(31-98)目的基因,将目的片段转入原核表达载体pGEX-4T-1,通过E.coli原核表达系统表达Pro-GRP (31-98)融合蛋白。通过杂交瘤技术制备筛选出稳定表达Pro-GRP (31-98)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体。最终使用Pro-GRP(31-98)单克隆抗体与多克隆抗体配对,建立起人血清Pro-GRP (31-98) ELISA定量检测方法。最后用16例小细胞肺癌患者血清验证检测体系是否可行。结果成功构建了Pro-GRP (31-98) E.coli原核表达系统,筛选出高效表达Pro-GRP(31-98)融合蛋白的大肠杆菌菌株。成功制备筛选出稳定分泌Pro-GRP (31-98)单克隆抗体的杂交瘤细胞株12株,其中R-2、R7和R9三株效价均高于1：1x106。多克隆抗体效价高于1：1x107。用生物素标记多克隆抗体作为检测抗体,采用双抗体夹心的方法建立ELISA检测体系,单抗包被浓度为1ug/mL,检测抗体使用浓度为0.2ug/mL,封闭液为2%BSA-5%羊血清-PBS。检测16例小细胞肺癌患者血清水平均值为576.87±514.06ng/L,中位值为508.35ng/L,检测敏感性为75%。结论成功制备了Pro-GRP (31-98)的单克隆抗体和多克隆抗体,成功建立了人血清Pro-GRP (31-98) ELISA检测方法,对16例小细胞肺癌患者血清进行了检测,检测结果与Abbott公司Pro-GRP检测产品结果一致。