硒化太子参多糖对巨噬细胞免疫作用及免疫损伤小鼠免疫保护作用的影响

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:thardway
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太子参多糖是太子参的主要有效成分,研究表明其具有免疫调节,抗应激,抗炎症,抗疲劳等作用。太子参多糖的硒化修饰对进一步提高太子参多糖的生物活性和新型药物的开发具有重要意义。本文选用太子参多糖为研究对象,为了探究硒化太子参多糖对免疫活性的影响,运用醇沉水提法获取太子参粗多糖,Sevage法除蛋白,DEAE-52纤维柱进行粗糖纯化,然后运用亚硒酸钠法,在不同时间、温度和不同亚硒酸钠浓度条件下对太子参多糖进行三因素水平的正交硒化修饰(L9(34)),从而得到了 9种硒化太子参多糖,分别为sRPP1~sRPP9。研究不同剂量以及不同类型的太子参多糖和硒化太子参多糖对RAW246.7巨噬细胞的免疫能力的影响,同时也研究不同剂量以及不同类型的太子参多糖和硒化太子参多糖对环磷酰胺(CY)所致的免疫损伤小鼠的免疫保护作用。试验结果如下:1运用MITT法比较了 9种硒化太子参多糖对RAW264.7巨噬细胞体外增殖的影响,选出了效果较好的4种硒化太子参多糖:sRPP2,sRPP3,sRPP8,sRPP9;通过在细胞中分别添加这4种硒化太子参多糖,检测硒化太子参多糖对细胞免疫活性影响;用Griess法测定太子参多糖及其硒化太子参多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7产生NO的影响;用ELISA法测定经过太子参多糖及其硒化太子参多糖刺激作用后对RAW264.7巨噬细胞lL-6,TNF-a分泌量的影响。结果表明,这4种硒化太子参多糖在一定浓度促进了巨噬细胞对中性红吞噬能力,NO产生量以及IL-6、TNF-α分泌。结论,硒化修饰的太子参多糖能够提高小鼠RAW264.7巨噬细胞的免疫活性,经过硒化的太子参多糖提高了本身的免疫活性。2硒化太子参多糖对免疫损伤小鼠免疫保护功能的影响测定了硒化太子参多糖对环磷酰胺诱导的免疫损伤小鼠模型免疫功能的影响。将雄性Balb/c小鼠220只随机分为11组,9个试验组皮下注射1、2、3mg/mL的sRPP2、sRPP3和RPP0.2 mL,健康对照组和模型对照组给予生理盐水,持续3天。第4 d,除健康对照组外,9个试验组和模型组均腹腔注射80 mg/kg/d环磷酰胺(CY),连续3d。于最后一次注射24 h后,每组抽取4只小鼠用碳粒廓清试验检测巨噬细胞的吞噬指数,其余小鼠称重后每组眼球采血后,颈椎脱臼处死,检测其细胞因子和免疫球蛋白的水平,采集内脏并称重,计算脾、胸腺指数,结果表明,太子参多糖及其硒化太子参多糖在一定的浓度能够促进免疫损伤小鼠巨噬细胞的吞噬能力,降低环磷酰胺(CY)对免疫器官的损伤,减弱由环磷酰胺(CY)造成免疫损伤小鼠血清中IgG和IgM含量降低的影响,以及减弱由环磷酰胺(CY)造成免疫损伤小鼠IL-6,TNF-α分泌量减小的影响,同时在不同的浓度,sRPP2,sRPP3的作用效果优于RPP。结论,太子参多糖及其硒化太子参多糖能够促进免疫损伤小鼠细胞因子的分泌,维持免疫球蛋白IgG和IgM的正常水平,促进机体的免疫能力提高,对受到CY刺激作用后免疫损伤小鼠有一定的免疫保护作用,硒化修饰的太子参多糖活性优于未被硒化的太子参多糖。
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