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目的:根据推拿滚法最佳动力学参数拟合推拿滚法压力-时间曲线;探索推拿滚法压力-时间曲线对人骨骼肌细胞生物力学效应的影响。
方法:实验分两部分进行。
推拿滚法压力-时间曲线拟合部分:课题组前期实验筛选出推拿滚法操作舒筋效应的最佳动力学参数操作模型,将最佳动力学参数输入MTS858材料试验机,拟合推拿滚法压力-时间曲线。
推拿滚法压力-时间曲线细胞力学效应研究部分:采用细胞培养技术,培养人骨骼肌细胞,利用超生理剂量地塞米松,建立人骨骼肌细胞损伤模型,并检测地塞米松损伤后不同时间段内人骨骼肌细胞的生物活力。将正常细胞和损伤细胞各自分为空白对照组、推拿滚法压力-时间曲线组、推拿滚法压力-时间曲线+维拉帕米组、静态压力-时间曲线组和静态压力-时间曲线+维拉帕米组。同时设计细胞加载箱,加载到MTS858操作平台上。利用细胞加载箱中的活塞对其中的人骨骼肌细胞施加压力载荷,并分别对各组细胞内MDA含量、SOD活力、细胞培养上清中CK活力进行检测,以期探索推拿滚法对人骨骼肌细胞生物力学效应的产生机制。
结果:以最佳动力学参数:力量(-10N,-40N)、频率2Hz、时间10min拟合推拿滚法压力-时间曲线;以动力学参数:力量-40N,时间10min拟合静态压力-时间曲线。人骨骼肌细胞在损伤24h后活力最高,且与正常人骨骼肌细胞活力接近。人骨骼肌细胞在损伤接近48h时活力迅速下降,至损伤72h后人骨骼肌细胞活力几乎为零,不具有实验意义。推拿滚法压力-时间曲线可以提高人骨骼肌细胞内SOD活力,降低细胞内MDA含量以及细胞上清中的CK活力。在加入钙离子拮抗剂维拉帕米后,各项指标的变化均受到明显的影响;静态压力-时间曲线能够升高人骨骼肌细胞内MDA含量以及细胞上清中的CK活力。
结论:滚法最佳动力学参数导入曲线与MTS实际输出曲线重叠,说明推拿滚法压力-时间曲线拟合良好,可以模拟推拿滚法作用特征。细胞实验显示,超生理剂量地塞米松对人骨骼肌细胞具有损伤作用。本实验中,推拿滚法压力-时间曲线可以减轻人骨骼肌细胞的损伤程度,促进损伤细胞的修复;人骨骼肌细胞中钙离子通道是推拿滚法压力-时间曲线起作用的途径之一,从而维持骨骼肌细胞微系统的动态平衡。静态压力-时间曲线在本实验中对人骨骼肌细胞的损伤作用大于修复作用,提示持久过大的压力载荷作用可能会加重人骨骼肌细胞的损伤。