【摘 要】
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该研究对具有良好免疫原性的结核杆菌分泌蛋白ESAT-6基因,进行了修饰改造,即通过PCR反应在基因的起始密码子前引入了有助于其在真核生物表达Kozak序列,在基因的末端附加了内
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该研究对具有良好免疫原性的结核杆菌分泌蛋白ESAT-6基因,进行了修饰改造,即通过PCR反应在基因的起始密码子前引入了有助于其在真核生物表达Kozak序列,在基因的末端附加了内质网滞留信号四小肽KDEL.改造后的基因导入了pBI121植物表达载体;将连有35S启动子和NOS终止子的ESAT-6切下,重新构建了带有潮霉素选择抗性基因的pCAMBIA1300/E-6植物表达载体,通过直接转化法,构建了pCAMBIA1300/E-6的根瘤农杆菌（EHA105）工程菌;采用叶盘法侵染番木瓜叶片,利用潮霉素选择培养基诱导筛选抗性愈伤组织,通过胚状体发生途径得到抗性苗,进一步诱导获得Hgy.抗性植株;对得到的13株抗性转化植株进行了PCR、PCR-Southern blot和Southern Blot检测,确认了4株转基因植株;对4株转基因植株进行了RNA dot blot检测,表明ESAT-6基因在4株转基因植株中均获得了表达.
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