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目的：在胆囊癌细胞系GBC-SD中利用RNA激活技术上调人胆囊癌细胞株（GBC-SD）中p21基因的表达，观察其对GBS-SD细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。探讨将p21基因作为胆囊癌靶向治疗分子的可能性及其机制，为胆囊癌的基因治疗提供一定的理论基础和试验依据。方法：应用脂质体LipofectamineTM2000将dsRNA转染入人胆囊癌细胞株（GBC-SD）中，设立三个实验组别，第一组为空白对照组，只加入脂质体；第二组为阴性对照组（dsControl），转染与人类基因组无序列同源性的dsRNA，第三组为实验组（dsp21-322），转染与p21基因启动子DNA序列互补的dsRNA分子1、分别采用RT-PCR法和Westernblot法检测三组p21WAF1/CIP1基因mRNA及蛋白的表达，比较三组mRNA和蛋白的表达差异；2、采用MTT法检测三组细胞增殖活性，并进行对比分析；3、用Transwell小室法检测三组细胞侵袭和迁移能力的情况，观察RNAa后细胞侵袭和迁移能力的改变。结果：1、dsRNA转染GBC-SD细胞72h后，RT-PCR及Westernblot结果显示：与空白对照组和阴性对照组相比，实验组dsp21-322能有效上调GBC-SD细胞p21基因的表达，可以使其表达量增加到2倍左右。2、MTT法显示实验组GBC-SD的生长抑制较阴性对照组明显，在第2~5天四个时间点上实验组的存活率分别为74.1%、51.3%、44.8%、39.6%，与阴性对照组相比都有统计学差异(P<0.05)。3、Transwell侵袭及迁移实验显示：实验组dsp21-322作用于胆囊癌细胞72h后，穿透至膜下表面的细胞数均低于空白组和对照组的细胞数差异有统计学意义（P<0.05）。结论：1、dsp21-322转染GBC-SD细胞72h后能显著上调p21基因mRNA和蛋白的表达2、转染dsp21-322后，GBC-SD细胞的增殖活性明显受到抑制，细胞侵袭及迁移能力明显下降，3、RNA激活技术为胆囊癌的基因治疗提供了一种新的治疗方法。