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塑化剂是工业上广泛应用的增塑剂,有增强物质柔韧性的作用。主要用于聚氯乙烯塑料、食品包装袋、儿童玩具、香料、化妆品等的生产。同时塑化剂也是环境激素类污染物,它可以在一定条件下从塑料中通过溶出、迁移和排放等途径进入周围生态环境,甚至通过皮肤、呼吸系统和消化系统进入人体,进而对人体健康造成潜在危害。因此,建立一种快速检测塑化剂的方法具有十分重要的意义。本文以4-硝基邻苯二甲酸为原料,分别与不同的醇反应衍生合成四种塑化剂结构类似物,包括直链结构的4-氨基邻苯二甲酸二丁酯、支链结构的4-氨基邻苯二甲酸二异丁酯、具有连接臂的4-戊二酸单酰邻苯二甲酸二丁酯和具有环状结构的4-氨基邻苯二甲酸二环己酯。通过重氮化法和活泼酯法将各种半抗原衍生物与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联制得人工抗原。利用氢核磁共振谱图(1HNMR))、质谱(MS)和红外谱图(IR)鉴定了主要的衍生物结构。利用紫外光谱扫描和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测鉴定人工抗原,并用四种与BSA偶联的人工抗原作免疫原免疫新西兰大白兔,以制备多克隆抗体。利用酶联免疫分析法(ELISA)检测抗体灵敏度和特异性。经紫外光谱和SDS-PAGE电泳证实人工抗原偶联成功,经免疫分析法检测抗体效价,DBAP-BSA抗体达到1：64000,DBCP-BSA、DiBAP-BSA和DCHAP-BSA抗体效价均达到1：128000。检出限分别是：DBAP-BSA(52.8ng/mL)、DBCP-BSA(35.5ng/mL)、 DiBAP-BSA(8.7ng/mL)、DCHAP-BSA(11.9ng/mL)。最佳工作范围分别为：DBAP-BSA (81.96～1138.037ng/mL)、DBCP-BSA(55.72～832.945ng/mL)、DiBAP-BSA (16.753～857.328ng/mL)、DCHAP-BSA (63.997～1222.221ng/mL)。样品加标回收率均在86%-105%范围内。由此可以得出以下结论：1)成功合成四种塑化剂半抗原衍生物。2)四种塑化剂抗体反应特异性较好。3)具有支链结构的DiBAP-BSA抗原在体内更容易被识别产生相应的抗体,其次为环状结构的DCHAP-BSA抗原和具有伸长臂结构的DBCP-BSA抗原。