MiR-145靶向结合ERG抑制结直肠癌侵袭迁移的研究

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目的:越来越多的研究指出miR-145对包括结直肠癌(colorectal cancer,CRC)在内的多种肿瘤发挥抑癌基因的作用。有研究发现成红细胞转化特异转录因子相关基因(Erythroblast transformation-specific related gene, ERG)有原癌基因的作用。然而miR-145和ERG在CRC的表达情况和相互调控对于肿瘤发生的作用并未被阐述。本研究旨在通过检测CRC样本中miR-145和ERG的表达水平,侵袭和转移的功能实验,评估miR-145对CRC诊断和预后的应用价值;筛选并鉴定miR-145靶基因,探讨miR-145如何与靶基因相互作用从而进一步了解其参与CRC发生和发展的机制。  方法:采用实时荧光定量PCR( quantitative real time PCR, qRT-PCR)的方法对CRC组织和细胞系进行miR-145检测。采用Western blot对CRC的ERG蛋白进行检测。通过划痕实验和transwell小室实验分析miR-145对CRC细胞迁移和侵袭能力的影响。通过双荧光素酶报告基因对miR-145对靶基因ERG的调控进行验证。  结果:在CRC细胞系和大部分的临床CRC组织样品中miR-145均呈低表达。功能实验显示miR-145异常表达抑制CRC细胞的迁移和侵袭能力。此外,ERG被认为是miR-145在CRC的新靶标,双荧光素酶报告基因实验显示miR-145与ERGmRNA的3’-端非编码区(3’ untranslated regions,3’-UTR)的潜在结合位点相互作用。另外,在CRC样本中,ERG的表达水平与miR-145的表达呈反向相关。相反地,过表达miR-145下调ERG的蛋白表达水平。  结论:本研究结果表明miR-145至少部分通过干扰转录因子ERG的表达从而抑制CRC细胞的迁移和侵袭。miR-145可能对CRC的进展发挥重要作用,并且可能作为CRC靶向治疗的一个新靶点。
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