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目的:探讨以(99m)~Tc-Annexin V为血栓活化血小板显像剂,进行静脉血栓放射性核素显像及其用于鉴别新鲜与陈旧静脉血栓的可行性。方法:1下腔静脉血栓动物模型的建立:普通级新西兰家兔3%戊巴比妥钠1-1.3ml/kg耳缘静脉注射麻醉,麻醉后固定于手术台,右侧腹备皮,沿腹直肌右外侧线切开皮肤4-6cm切口,逐层钝性分离腹壁肌肉、腹膜,入腹腔后钝性分离后腹膜,暴露右肾下极水平以远约4cm长的下腔静脉,将长约3cm自制单股螺旋铜丝向心方向穿刺入下腔静脉留置,缝合血管,止血,观察下腔静脉回流通畅后回纳肠管,逐层缝合腹膜、肌肉、皮肤。2分组:将普通级新西兰家兔24只,随机分成4组,ANX V((99m)~Tc-Annexin V,以下同)新鲜血栓组、ANX V陈旧血栓组、HSA((99m)~Tc-人血清白蛋白,以下同)新鲜血栓组、ANX V假手术组,前三组按前述方法制备下腔静脉血栓模型,ANX V假手术组只行开腹手术做为对照,未在下腔静脉穿刺置铜丝。3 (99m)~Tc-Annexin V、(99m)~Tc-人血清白蛋白标记:(99m)~Tc-Annexin V标记,取一洁净反应瓶,依次加入Annexin V 30μg、ACD溶液500μl、10mg/ml酒石酸钾钠溶液100μl、新鲜SnCl2/HCl溶液10μl,震荡摇匀,于2-4℃冷藏静置20min,加入新鲜淋洗的高锝酸钠溶液1ml(1110MBq/ml),室温下静置反应20min,标记完毕。(99m)~Tc-HSA标记参照药盒说明书。4活体及离体显像:ANX V新鲜血栓组、ANX V假手术组两组于手术后22-26h行(99m)~Tc-Annexin V显像,ANX V陈旧血栓组于造模术后14天行(99m)~Tc-Annexin V显像,HSA新鲜血栓组于造模术后22-26h行(99m)~Tc-HSA显像。分别于注入显像剂后20min、40min、60min、90min和2h进行静态平面显像。SPECT仪采用低能高分辨准直器,能峰:140keV,窗宽:20%。采集:1000K计数,矩阵:256×256,放大:2倍。在核素显像结束后,利用SPECT仪所带的CT,对各血栓组实验兔行CT扫描。另ANX V新鲜血栓组三只实验兔处死后,切取约4厘米长内含血栓下腔静脉,行离体组织显像,能峰:140keV,窗宽:20%。采集:50K计数,矩阵: 128×128,放大:4倍。5图像分析:分别在各血栓组实验兔所得图像上勾画下腔静脉血栓部位和右后肢根部的等面积感兴趣区(ROI),ROI面积为20个像素(以下同),后者作为本底,计算血栓部位与本底(T/B)放射性比值。ANX V假手术组于与血栓组血栓部位对应下腔静脉部位(紧邻右肾下极水平以远下腔静脉,以下简称对应下腔静脉)和右后肢根部(做为本底区)勾画等面积ROI,计算对应下腔静脉部位与本底(T/B)放射性比值。以及计算各血栓组血栓部位及假手术组对应下腔静脉部位分别与头侧下腔静脉(血栓头侧紧邻右肾上极以上水平下腔静脉,以下同)等面积ROI的放射性比值。6离体组织百分注射剂量率测算:显像完毕注射过量戊巴比妥钠处死动物,ANX V新鲜血栓组、ANX V陈旧血栓组,分别取血栓、血液、血栓部位下腔静脉、头侧下腔静脉、后肢肌肉、胃、心、肺、肝、肾、脾、骨及小肠组织。ANX V假手术组取右肾下极水平以远约3cm静脉血管及上述除血栓和头侧下腔静脉的其他脏器组织,HSA新鲜血栓组取血栓、血液、血栓部位下腔静脉、头侧下腔静脉及后肢肌肉组织。将上述所取组织生理盐水冲洗干净,纱布粘干,测所取各组织及血液放射性计数并准确称重,计算所取标本的每克组织百分注射剂量率(%ID/g)。计算各血栓组血栓分别与血液、血栓部位下腔静脉、头侧下腔静脉、肌肉的每克组织百分注射剂量率的比值。7病理:留取各血栓组血栓标本立即置于福尔马林固定液中,将所留存血栓标本HE染色确定血栓病理特征。结果:1 (99m)~Tc-Annexin V活体显像,ANX V新鲜血栓组5只新鲜血栓模型实验兔中,4只下腔静脉血栓部位可见清晰放射性浓聚影,1只隐约可见血栓部位放射性增浓影,CT扫描显示铜丝部位与血栓显影部位一致,显影出现时间由20-90分钟不等,逐渐增浓后减淡。ANX V陈旧血栓组、HSA新鲜血栓组平面显像实验兔血栓部位均未见放射性浓聚,ANX V假手术组实验兔下腔静脉走行区均未见放射性浓聚。将ANX V新鲜血栓组三只实验兔约4厘米内含血栓下腔静脉离体标本显像,可见血栓部位放射性浓聚,内无血栓下腔静脉部位呈略高于本底淡影。2静态平面显像ANX V新鲜血栓组血栓部位/头侧下腔静脉部位、血栓部位/本底等面积ROI放射性比值(1.62±0.26、4.06±0.49)高于ANX V陈旧血栓组(1.03±0.18、2.46±0.38)和HSA新鲜血栓组(0.99±0.09、2.16±0.24),P均<0.05,也高于ANX V假手术组对应下腔静脉部位/头侧下腔静脉部位、对应下腔静脉部位/本底等面积ROI放射性比值(0.96±0.05、2.27±0.24),P均<0.05。ANX V新鲜血栓组血栓百分注射剂量率(0.01894±0.00216%ID/g)高于ANX V陈旧血栓组(0.00473±0.00128%ID/g)、HSA新鲜血栓组(0.00345±0.00110%ID/g),P均<0.05。ANX V新鲜血栓组血栓分别与血液、血栓部位下腔静脉血管、头侧下腔静脉血管、肌肉的组织百分注射剂量率比值(3.42±1.06、26.32±13.60、31.23±16.00、111.62±52.23)也均高于ANX V陈旧血栓组(0.98±0.09、5.12±2.01、6.25±2.38、21.82±5.93)、HSA新鲜血栓组(0.77±0.08、2.45±0.62、2.62±0.87、9.91±4.51),P均<0.05。3 ANX V新鲜血栓组1只隐约显影实验兔血栓病理为混合血栓但红色血栓居多;余ANX V新鲜血栓组及HSA新鲜血栓组血栓病理均为新鲜混合血栓;ANX V陈旧血栓组血栓病理均为陈旧机化混合血栓。结论:(99m)~Tc-Annexin V实验动物活体显像中富含活化血小板的新鲜静脉混合血栓能够显影,且显示了良好的靶本比,而陈旧静脉混合血栓未能显影,提示(99m)~Tc-Annexin V有望成为一种新的急性静脉混合血栓显像剂,并有望应用于鉴别新鲜与陈旧静脉血栓。