P物质和降钙素基因相关肽在正常及炎性牙龈组织中的表达差异研究

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目的:P物质(substance P, SP)和降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide, CGRP)是最早发现的神经肽之一,在各种组织中呈现多样的生理效应,并可控制免疫应答。SP和CGRP含有神经不仅在牙龈组织中共存,而且在诱导牙体和牙周支持组织的局部神经源性炎症方面有很多相似的作用,神经系统和免疫系统的双向对话在牙龈炎症中发挥了重要作用。我们通过检测P物质及降钙素基因相关肽在正常牙龈组织与炎性牙龈组织中的表达差异,证实神经因素参与牙周炎发生、发展及牙周组织修复,为进一步探讨牙周炎的发病机制提供依据。方法:1.标本的选择及实验分组临床随机收集滨州医学院附属医院口腔内科20-60岁2010-2011年来就诊患者40例。健康对照组标本20例:来自于无智齿冠周炎的阻生齿拔除术或多生牙拔除术中切除的沿龈缘至根方深3mm,长2mm的正常牙龈组织,男12例,女8例,平均年龄36.8岁(20-50)岁。标准:牙龈色泽正常,无红肿、无增生、无萎缩、无牙周袋、无牙石软垢、无全身系统性疾病。炎性实验组标本20例:来自于中重度(PD≥6mm)慢性牙周炎患者于牙周翻瓣术中切除的自龈缘至根方深3mm,长2mm的牙周袋壁牙龈组织,男9例,女11例,平均年龄45.6岁(35-65岁)。标准:牙龈组织充血水肿,易出血,牙周袋深度≥6mm,X线检查牙槽骨吸收至牙根的1/2-2/3左右,松动度为Ⅰ°~Ⅱ°,无全身系统性疾病。2.组织切片将手术所取标本迅速放入4%多聚甲醛固定液4℃固定24h,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,切片,片厚约4um。切片后分别行SP和CGRP免疫组化染色。采用免疫组织化学PV两步法,检测在20例正常牙龈与20例慢性中度牙周炎患者(PD≥6mm)的炎症牙龈组织中的表达情况。结果:1.健康组牙龈组织仅在上皮层有SP弱阳性表达,炎性组牙龈组织上皮层和结缔组织层都有阳性表达,上皮层浅棕色阳性染色主要位于棘细胞层,结缔组织层棕黄色阳性表达主要集中在炎症细胞的胞浆中。炎症细胞着色较上皮细胞更加明显。健康组与炎性组上皮层和结缔组织层阳性染色相比有明显差异,具有统计学意义(P<0.05)。2.健康组牙龈组织上皮层CGRP浅棕色阳性表达分布于角化层、颗粒层与棘细胞层,而炎性组牙龈组织上皮全层包括角化层、颗粒层、棘细胞层、基底细胞层均有棕黄色强阳性表达,差异有统计学意义(P<0.01);健康组的结缔组织中CGRP呈弱阳性表达,炎性组结缔组织层呈现出棕黄色强阳性表达,该差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:P物质和CGRP在牙龈组织炎症的发生发展中起到了重要作用,神经因素参与牙周炎发生发展及修复机制。
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