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背景与目的：近年来研究表明幽门螺杆菌(Helicobacterpylori，H.pylori)能通过激活p38MAPK信号通路上调COX-2基因表达，并能促进胃癌血管新生，但COX-2引起胃癌血管新生的具体途径并不清楚。本研究旨在揭示COX-2激活Wnt/β-catenin信号通路调控H.pylori感染的人胃癌血管新生的机制，并探讨健脾解毒方组方的中药复方通过COX-2-Wnt/β-catenin信号途径调控人胃癌血管新生的作用机制，进一步从血管新生的角度揭示H.pylori感染胃癌发生发展机理，明确中药复方防治Hpylori相关性胃癌的作用靶点。 方法：针对人类COX-2基因mRNA序列，选择COX-2基因的siRNA干扰靶点，设计4个siRNA干扰位点，构建COX-2基因沉默慢病毒载体质粒pFU-GW-COX-2-shRNA，功能鉴定并将构建好的COX-2干扰慢病毒感染人胃癌MKN45细胞，建立COX-2稳定低表达的人胃癌MKN45细胞株。并利用Westernblot、ELISA等方法检测H.pylori感染MKN45细胞2-48h胞浆、胞核β-catenin及胞浆P-β-catenin表达的影响；H.pylori对MKN45细胞VEGF、bFGF、Ang-2表达的影响；沉默COX-2基因或抑制COX-2表达后MKN45细胞胞浆、胞核β-catenin蛋白表达及VEGF、bFGF、Ang-2表达情况；抑制Wnt/β-catenin信号通路对VEGF、bFGF、Ang-2表达的影响。采用CCK-8法检测不同浓度健脾解毒方醇提物对MKN45细胞的生长抑制情况；Westernblot检测健脾解毒方醇提物高中低剂量分别作用H.pylori感染的MKN45细胞12和24h后胞浆、胞核β-catenin的表达；ELISA法检测作用12h后VEGF、bFGF、Ang-2表达情况。 结果：H.pylori感染MKN45细胞2-48h胞浆、胞核中β-catenin蛋白的表达量显著增强，在12h处到达峰值，胞浆中P-β-catenin蛋白的变化与胞浆中β-catenin蛋白的表达呈相反趋势；H.pylori刺激细胞产生VEGF因子，2-48hVEGF表达水平依次升高。成功构建COX-2基因干扰慢病毒载体，并感染胃癌MKN45细胞，实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)和Westernblot结果显示COX-2基因干扰慢病毒能显著降低MKN45细胞COX-2mRNA和COX-2蛋白的表达。沉默COX-2基因或抑制COX-2途径后MKN45细胞胞浆、胞核β-catenin蛋白也明显受到抑制，抑制Wnt/β-catenin信号通路后，VEGF、bFGF、Ang-2表达水平也明显下调。健脾解毒方醇提物能以剂量依赖性方式下调MKN45细胞胞浆、胞核β-catenin蛋白表达，并能下调VEGF、bFGF、Ang-2表达水平。 结论：H.pylori感染能够激活人胃癌细胞Wnt/β-catenin信号通路，并引起VEGF、bFGF和Ang-2表达上调，而沉默COX-2基因或阻断COX-2途径后，Wnt/β-catenin信号通路的激活受到抑制，VEGF、bFGF、Ang-2表达水平均呈下降趋势。说明H.pylori可能是通过COX-2途径激活Wnt/β-catenin信号通路影响血管生成因子的表达。中药健脾解毒方复方醇提物能有效抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活，并下调血管生成因子的表达。提示中药健脾解毒方复方可通过COX-2-Wnt/β-catenin信号转导途径来抑制H.pylori介导的胃癌血管生成因子的表达。