【摘 要】
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慢病毒感染卵母细胞和分子靶向核酸酶（ZFN，TALEN及CRISPR/Cas9等）是非人灵长类基因编辑动物模型构建中最常用的两种方法。利用这两种方法获得的首建动物(F0)往往是嵌合体，这导致
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慢病毒感染卵母细胞和分子靶向核酸酶（ZFN，TALEN及CRISPR/Cas9等）是非人灵长类基因编辑动物模型构建中最常用的两种方法。利用这两种方法获得的首建动物(F0)往往是嵌合体，这导致科学家们很难在F0代得到基因型和表型一致的动物模型。传代到F1可以有效解决嵌合体问题，但常用的恒河猴和食蟹猴正常性成熟时间至少需要4年，加上半年的怀孕期，即至少需要4.5年才能得到F1代。这严重限制了基因编辑恒河猴和食蟹猴模型的推广和应用。本研究中，以食蟹猴为研究对象，通过早期胚胎基因编辑效率检测分析和使用sgRNA组合方法优化了基于CRISPR/Cas9的基因编辑猴模型构建技术，并得到了高嵌合突变比例的Prrt2和Bmal1基因编辑首建猴。为了加快基因编辑猴模型的传代进程，成功建立了食蟹猴精巢异种移植和激素诱导的成熟加速技术，将食蟹猴的性成熟周期最短缩短到了15个月，并利用提早成熟的精子进行胚胎构建得到了健康的食蟹猴后代。还成功地利用繁殖加速技术提早得到Mecp2转基因猴F1代出生个体及Mecp2转基因猴F1代和Prrt2基因编辑猴F0代的精子。基于CRISPR/Cas9的高效基因编辑猴构建技术和食蟹猴繁殖加速技术的建立，将极大地推动非人灵长类基因编辑模型在生命科学研究中的应用。
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