论文部分内容阅读
目的:血管内皮生长因子C(VEGF-C)属于血管内皮生长因子(VEGF)家族成员,被认为是目前发现的唯一特异性淋巴管生成因子。VEGF-C主要通过其受体VEGFR-2、VEGFR-3发挥作用,是一种重要的血管、淋巴管内皮细胞调节因子。近年来的很多实验研究了VEGF-C在肿瘤的发生发展中的作用,结果表明VEGF-C能介导肿瘤的淋巴管生成,与淋巴道扩散及淋巴结转移有关。本研究目的旨在观察脂质体介导的VEGF-C反义寡核苷酸对肺癌裸鼠皮下种植瘤模型微淋巴管生成的影响。方法:建立BALB/C小鼠皮下肺癌模型30只,将动物随机分为磷酸盐缓冲液对照组(PBS组)、正义寡核苷酸对照组(SODN组)和反义寡核苷酸干预组(AODN组)。接种人肺腺癌细胞株A549的3天后,用PBS、SODN及AODN分别皮下注射进行治疗,每周观察肺癌裸鼠皮下种植瘤的生长速度和特点。建模四周后,处死动物,留取瘤体标本,取肿瘤标本称重,行常规病理检查及HE染色。采用RT-PCR、Western Blot和免疫组织化学方法检测VEGF-C反义寡核苷酸对肺癌裸鼠种植瘤中VEGF-C mRNA和蛋白质表达水平以及微淋巴管生成的影响。结果:经寡核苷酸干预注射后,在一周内各组肿瘤体积增长速度无明显差别。第二周就观察到AODN组肿瘤体积(38.2±1.6)明显较其余两组小(P<0.01),第二周AODN组肿瘤增长速度缓慢,甚至停止生长,但肿瘤并没有消失。SODN组和PBS组种植瘤依然生长,但是SODN组肿瘤体积增长速度较PBS组肿瘤生长稍缓慢,但无统计学差异(P>0.05)。第四周AODN组肿瘤体积(58±11.7)与前两组相比有差异显著(P<0.01),种植瘤重量(0.56±0.11)与其他二组相比有统计学差异(P<0.05)。同时,AODN组内的VEGF-C mRNA和蛋白表达量(4.61±1.57)显著低于其余二组,有统计学意义(P<0.05)。AODN组种植瘤内微淋巴管密度(3.2±1.7)显著减少,各组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:脂质体介导的VEGF-C反义寡核苷酸可以降低肺癌裸鼠皮下种植瘤的生长速度,同时显著降低种植瘤内VEGF-CmRNA和蛋白的表达水平,并对其微淋巴管生成具有较强抑制作用,有可能阻止肺癌肿瘤细胞的转移。